Abstract

ijcs

International Journal of Cardiovascular Sciences

Int. J. Cardiovasc. Sci.

2359-5647 2359-4802

Sociedade Brasileira de Cardiologia

7vRR5T4MTrK8T7FPdznDFkN

S2359-56472017000300235

10.5935/2359-4802.20170046

Original Articles

Assessment of Bioactive Compounds, Physicochemical Composition, and In Vitro Antioxidant Activity of Eggplant Flour

Scorsatto

Mauara

1 Pimentel

Aline de Castro

1 Silva

Antonio Jorge Ribeiro da

2 Sabally

Kebba

4 Rosa

Glorimar

3 Oliveira

Gláucia Maria Moraes de

1 Universidade Federal do Rio de Janeiro Programa de Pós-gradução em Medicina/Cardiologia Brazil Programa de Pós-gradução em Medicina/Cardiologia - Universidade Federal do Rio de Janeiro Universidade Federal do Rio de Janeiro 2 Universidade Federal do Rio de Janeiro Instituto de Pesquisa de Produtos Naturais Brazil Instituto de Pesquisa de Produtos Naturais - Universidade Federal do Rio de Janeiro Universidade Federal do Rio de Janeiro 3 Universidade Federal do Rio de Janeiro Instituto de Nutrição Josué de Castro

Rio de Janeiro

Brazil Instituto de Nutrição Josué de Castro - Universidade Federal do Rio de Janeiro Rio de Janeiro, RJ - Brazil Universidade Federal do Rio de Janeiro 4 McGill School of Dietetics and Human Nutrition

Montreal

Canada School of Dietetics and Human Nutrition - McGill Montreal - Canada McGill University

Mailing Address: Gláucia Maria Moraes de Oliveira, Hospital Universitário Clementino Fraga Filho - UFRJ Rua Prof. Rodolpho P. Rocco, 255 8º andar, sala 6,Cidade Universitária. Postal Code: 21941-913, Rio de Janeiro, RJ - Brazil. E-mail: glauciam@cardiol.br

Author contributions

Conception and design of the research: Scorsatto M, Silva AJR, Rosa G, Oliveira GMM. Acquisition of data: Scorsatto M, Pimentel AC, Sabally K. Analysis and interpretation of the data: Scorsatto M, Pimentel AC, Sabally K. Statistical analysis: Scorsatto M, Silva AJR, Sabally K. Obtaining financing: Rosa G, Oliveira GMM. Writing of the manuscript: Scorsatto M. Critical revision of the manuscript for intellectual content: Scorsatto M, Silva AJR, Rosa G, Oliveira GMM. Supervision/as the major investigador: Scorsatto M, Rosa G, Oliveira GMM.

Potential Conflict of Interest

No potential conflict of interest relevant to this article was reported.

May-Jun 2017

30 3 235 242 19 01 2017 06 03 2017 06 03 2017

This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License, which permits unrestricted use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited.

Abstract Background:

The eggplant (Solanum melongena) is a fruit of world consumption. Its processing in the form of flour is a way to avoid losses and to take advantage of its nutritional characteristics.

Objective:

This study assessed the physicochemical composition (moisture, proteins, lipids, crude fiber, carbohydrates, minerals, niacin, saponins, titratable acidity, dietary fiber, and total phenols) of eggplant flour prepared from the whole fruit dehydrated in an oven.

Methods:

In vitro antioxidant activity was assessed using the following methods: 2.2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical (DPPH); Ferric Reducing/Antioxidant Power (FRAP); and analysis of polyphenols using HPLC (chlorogenic acid, caffeic acid, ferulic acid, and rutin).

Results:

It was possible to observe: 23.09% carbohydrates; 13.34% proteins; 1.85% lipids; 39.19% total fibers; 1,540 mg/100 g total soluble phenolic compounds; 840 mg/100 g saponins; minerals (potassium, magnesium, copper, iron, zinc, manganese); and niacin. In vitro antioxidant activity was observed through DPPH (455.6 mg ascorbic acid/100 g) and FRAP (486.8 mg ascorbic acid/100 g). The HPLC method determined the presence of ascorbic acid, tyrosine, and phenolic acids (chlorogenic acid, caffeic acid, and ferulic acid).

Conclusion:

The eggplant flour had great fiber content in addition to good content of phenolic compounds and saponins with important antioxidant capacity observed through in vitro assays. As a result, eggplant flour is a good addition to the diet of the population, since it can bring potential health benefits.

Keywords: Solanum Melongena Antioxidants Diet Nutrition Phenolic Compounds Hyperlipidemias

Introduction

The eggplant (Solanum melongena, L.) is a fruit consumed worldwide and commonly grown in subtropical and tropical regions. It originated in India and was introduced in Brazil by the Portuguese in the 16^th century.1 It is currently grown by small-scale producers in practically all the Brazilian territory; however, eggplant production suffers heavy losses during the harvest period due to oversupply.2

The eggplant is a good source of minerals and vitamins. In addition to being rich in fiber and having low lipid content, it contains a variety of phytochemicals, such as polyphenols, which provide important health benefits.3 One way to avoid losses and capitalize on the nutritional characteristics of eggplant is processing it into flour. Eggplant flour (EF) is a highly desirable food ingredient to enrich the diet; however, there are few data on its chemical composition.4

Studies have shown that phenolic compounds of eggplant have the potential to reduce intestinal glucose absorption and provide cellular antioxidant protection, preventing oxidation and diabetes complications,5 especially those phenolic compounds present in eggplant peel.6 In addition, the eggplant peel is rich in anthocyanins and has therapeutic potential for the treatment of hyperlipidemia and prevention of atherogenic cardiovascular diseases by inhibiting lipid peroxidation.7 Gonçalves et al.8 conducted a literature review comprising 25 articles on the species S. melongena and concluded that this species has a mitigation effect on dyslipidemia, particularly hypercholesterolemia, when used in the form of juice made from the fruit with peel.

Cooking methods tend to reduce the content of polyphenols in fruits and vegetables, for example by simply removing their peel, since the higher concentrations of these substances are often present in the external parts.9 Even though several studies have addressed the eggplant in its different forms (in natura, juices, teas, extracts), studies that present a broad analysis of EF produced from the whole fruit dehydrated in an oven are scarce. The authors consider that this process is more accessible to the general public than the freeze-drying process.

The goal of the present study was to assess the physicochemical composition of EF prepared from the whole fruit dehydrated in an oven, characterizing qualitatively and quantitatively phenolic compounds, niacin, and saponins, in addition to assessing in vitro antioxidant activity using 2.2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical (DPPH) and Ferric Reducing/Antioxidant Power (FRAP) assays.

Material and Method Standards and reagents

High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) reagents and standard chlorogenic acid 3878, caffeic acid 0625, ferulic acid 12.870, and rutin 5143 were purchased from Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA). The samples were analyzed using a Varian HPLC system, with a tertiary gradient pump, variable-wavelength UV/VIS absorbance detector, and an automatic sampler with a refrigerated compartment (Varian Canada Inc., Mississauga, ON, Canada). The Folin-Denis reagent (Fluka) was purchased from Sigma-Aldrich Brazil LTDA.

Preparation of samples

The samples of EF used for analysis were purchased in stores of Rio de Janeiro, Brazil. According to the manufacturer, the eggplants produced in the State of Rio de Janeiro had originally been sanitized, sliced, and dehydrated in an oven at a temperature between 62°C and 70°C for approximately ten hours. Subsequently, they were placed in containers, sealed until complete cooling and the next day they were ground and packaged immediately. The final result was a dark beige thick powder. Samples from different lots were homogenized and the analyses were performed in triplicate.

Physicochemical Analysis

Moisture content was determined by weight loss in an oven set at 105°C until constant weight.10 The determination of fixed mineral residue (FMR) was based on the burning of organic matter in a muffle furnace at 550ºC until the ashes were white or slightly grey. The ashes allowed the analysis of specific minerals since they were composed of macro-and micronutrients-and trace elements.10

Proteins were determined through Kjeldahl digestion process, by which organic matter was decomposed by sulfuric acid and nitrogen was transformed into ammonia.10

Lipids were determined through continuous diethyl ether extraction in a Soxhlet apparatus, followed by the removal of the ether through evaporation.10

The analysis of crude fiber content was conducted in an industrial digester (Marconi MA-444/CI) subjecting the samples to acid digestion with 1.25% sulfuric acid solution, followed by alkaline digestion with 1.25% sodium hydroxide.10

Total carbohydrates were estimated by difference, subtracting the values obtained for moisture, proteins, lipids, ashes, and fibers from 100.

Total titratable acidity (TTA) was determined by titration with 0.1 N NaOH, using alcoholic solution of phenolphthalein to determine color change.10

Total dietary fiber was determined using the method proposed by Prosky et al.,11 in addition to soluble and insoluble dietary fiber.12^,13

The determination of minerals (K, Ca, Na, Mg, Cu, Fe, Mn, and Zn) was performed through atomic absorption spectrophotometry, using an Analytik Jena spectrophotometer (Model ContrAA® 700).

Niacin concentrations were determined using the method proposed by Horwitz et al.14

Total phenols were determined using Folin-Ciocalteu reagent.15

Saponins content was determined using the double-solvent extraction gravimetric method described by Harborne.16^,17

In vitro antioxidant activity Sample extraction<xref ref-type="bibr" rid="B18">18</xref>

The EF was weighted (500 mg) and placed in 15-mL plastic tubes to which 10 mL of 80% methanol were added. The mixture was vigorously shaken using a vortex mixer for two minutes. The samples were then centrifuged at 5000 rpm for 15 minutes and the supernatant was filtered using Whatman filter paper (0.45 µm). The waste was re-extracted two more times with additional 10 mL of 80% methanol. The three extracts were combined to carry out the DPPH and FRAP assays and the analysis of phenolic acids through HPLC assay.

Scavenging method of DPPH free radical<xref ref-type="bibr" rid="B19">19</xref> Ferric reducing/antioxidant power<xref ref-type="bibr" rid="B20">20</xref> Analysis of phenolic acids and flavonoids through HPLC

The samples were analyzed using a Gemini-NX reverse-phase (RP)-HPLC column (100 x 4.5 mm) (Phenomenex, CA, USA), using 1 mL/min solvent flow rate, and detection was at 215 nm. Gradient elution was carried out with a mixture of the following solvents: Solvent A: 0.05% trifluoroacetic acid (TFA) in 10% aqueous acetonitrile (ACN); and solvent B: 0.05% TFA in 60% aqueous ACN (v/v), starting with 100% solvent A and reaching 40% solvent A and 60% solvent B in 30 minutes.

Phenolic acids and flavonoids were identified through comparisons with the retention time (RT) and UV spectra of authentic standards analyzed under identical analytical conditions. Ascorbic acid, tyrosine, chlorogenic acid, caffeic acid, ferulic acid, and rutin were analyzed. The same standards were used for calibration curves to quantify these substances in the EF. The results are presented as mean and standard deviation.

Statistical analysis

Data are expressed as mean ± standard deviation for continuous variables. The linear regression analysis was performed to estimate ascorbic acid, tyrosine and phenolic acids in EF, after analysis of assumptions for the use of the regression analysis. The statistical analysis was performed using the Statistical Package for Social Sciences, version 21 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).

Results

The results of the centesimal composition are shown in Table 1 and the results of minerals, niacin, soluble phenolic compounds, and saponins are shown in Table 2.

Table 1 Centesimal composition of eggplant flour

Centesimal composition (g)	Mean ± standard deviation
Kcal	162.37 ± 11.65
Total carbohydrates¹	23.09 ± 0.50
Proteins	13.34 ± 0.50
Lipids	1.85 ± 0.03
Total dietary fiber	39.19 ± 0.08
Soluble dietary fiber	10.36 ± 0.17
Insoluble dietary fiber	28.83 ± 0.10
Ashes	4.70 ± 0.04
Moisture	11.89 ± 0.34

Calculated by difference.

Table 2 Minerals, niacin, phenolic compounds, and saponins present in eggplant flour

mg/100 g	Mean ± standard deviation
Potassium	2396.0 ± 83.8
Magnesium	158.1 ± 1.1
Sodium	68.1 ± 1.4
Copper	1.0 ± 0.03
Iron	2.9 ± 0.06
Manganese	2.5 ± 0.03
Calcium	130.9 ± 2.2
Zinc	2.1 ± 0.01
Niacin	1.49 ± 0.08
Total soluble phenolic compounds¹	1540.0 ± 0.1
Saponins	840 ± 0.89

Results are expressed in terms of gallic acid equivalent (mg).

In vitro antioxidant activity Activity of DPPH free radical elimination

The increase in DPPH radical scavenging in a dose-dependent manner due to the elimination of the methanolic extract of EF is 455.6 ± 3.27 ascorbic acid equivalent (mg). The results of the determination of antioxidant activity performed using the FRAP 486.8 ± 86.8 ascorbic acid equivalent (mg).

The following compounds were detected through HPLC assay: ascorbic acid (RT = 1.06 min); tyrosine (RT = 1.68 min); chlorogenic acid (RT = 7.36 min); caffeic acid (RT = 8.57 min); and ferulic acid (RT = 9.24 min) (Figure 1). Calibration information and estimation of phenolic compounds and antioxidants present in EF are shown in Table 3.

Table 3 Calibration information and estimation of ascorbic acid, tyrosine, and phenolic acids in eggplant flour

Polyphenols	Linear range (µg/mL)	Calibration curves	r²	Mean ± standard deviation (mg/g)
Ascorbic acid	10-100	y = 2668.4 x – 35546	0.9921	1.73 ± 0.20
Tyrosine	2-100	y = 1069.4 x – 1243.6	0.9972	1.21 ± 0.06
Chlorogenic acid	2-100	y = 6236.2 x + 12574	0.9979	1.73 ± 0.69
Caffeic acid	2-100	y = 10415 x – 25130	0.9985	0.19 ± 0.02
Ferulic acid	2-100	y = 6667.9 x + 21757	0.9969	0.04 ± 0.02
Rutin	2-100	y = 1659.1 x + 4048.9	0.9964	1.73 ± 0.20

Figure 1 Phenolic compounds and antioxidants extracted from the eggplant flour: a ascorbic acid; b tyrosine; c chlorogenic acid; d caffeic acid; and e ferulic acid.

Discussion

The Brazilian Government Health Authority has shown a growing interest in the development and promotion of strategies for the prevention of cardiovascular diseases, mainly for a better control of the known risk factors, such as smoking, obesity, sedentary lifestyle, hyperglycemia, hypertension, and hypercholesterolemia.21 Thus, the search for healthy and low-cost alternatives that can contribute to the health of the population becomes imperative.

A study conducted by Perez and Germani4 showed that EF had high fiber content (44%). A similar result was obtained by Possetti and Dutra (2011),22 who found 45% fibers. In addition to low content of lipids (1.99%), there were 6.2% ashes, 25.54% carbohydrates, and 8% proteins. Even though fibers do not supply nutrients to the body, they are essential in the diet. They promote a number of health benefits in view of which the use of EF is considered a potential food ingredient.

In the present study we found 39.2% total fibers, 1.85% lipids, 4.7% ashes, 23.1% carbohydrates, and 13.34% proteins, in addition to a good mineral content, highlighting manganese, zinc, and copper. It is observed that, although there are small variations between the different studies, the EF features around 40% fibers and low lipid content. When compared with wheat flour, it was observed that EF featured higher levels of protein, ashes, total dietary fiber, and total sugars, whereas carbohydrate content was lower. In this way, the high dietary fiber content, the high water absorption capacity, and the ease of grinding make EF a good alternative to be mixed with wheat flour. This mixed flour can be used in the preparation of bakery products (cookies, breads, cakes, and pasta), expanding the number of products to supplement the daily fiber intake.4

An analysis performed with the eggplant pulp showed a concentration of 62.5 mg gallic acid equivalent/100 g in the fresh pulp.23 This value is lower than that found in the present study with EF prepared from the whole fruit, which was 1,540 mg gallic acid equivalent/100 g in the flour. This is an expected result, since eggplant skin is rich in polyphenols and 100 g EF represent 1,000 g of the fruit. Another study showed greater presence of total phenols in extracts prepared from the eggplant peel (2,200 µg/g) than in extracts made from the pulp (390 µg/g).24

The results of a study assessing the centesimal composition of 20% eggplant extract showed that nutrient concentrations found in the present study were much larger than those found by those authors: 0.118% proteins; 0.052% ashes; 0.0366% lipids; 0.038% insoluble fibers; 0.025% soluble fibers; and 256.66 mg/dL total polyphenols. Even though the amount of polyphenols was significant, they were not able to protect mice against the oxidation of LDL-cholesterol, probably due to the presence of biogenic amines, especially histamine. These results do not support the popular use of S. melongena extract as hypocholesterolemic agent. On the other hand, Guimarães et al.25 assessed S. melongena powder and found 15.09% protein, 1.42% lipids, 13.89% fibers, 0.22% calcium, and 0.31% phosphorus, and qualitative tests assessing composition showed positive results for the presence of polyphenols and saponins. These results are similar to those found in the present study regarding proteins and lipids (13.34 and 1.85%, respectively); however, far below with respect to fiber (39.19%, i.e., fiber concentration in EF was 2.8 times greater) and calcium concentrations.

A study on extracts prepared from the pulp and the peel of eggplant showed a greater presence of soluble phenolic compounds in the peel than in the pulp, and the ability to inhibit DPPH radical was greater in all the extracts prepared from the pulp of eggplant than in those prepared from the peel. These results suggest that greater phenolic content allows moderate antioxidant activity linked to free radical scavenging potential.5 The present study showed similarity between the results of DPPH and FRAP, thus revealing the antioxidant capacity of EF, possibly due to the important presence of phenolic compounds.

A comparison performed between raw, grilled for 4 to 5 minutes on both sides, and boiled in water for 10 minutes over moderate heat 100 ºC and freeze dried after the process, showed the following concentrations of total polyphenols/100 g dry matter: raw = 910 mg; grilled = 1,803 mg; and cooked = 1,991 mg. The chlorogenic acid concentrations were as follows: 154 mg; 549 mg; and 439 mg, respectively. The concentrations of caffeic acid were: 12.8 mg; 23.3 mg; and 33.9 mg, i.e., the grilling and boiling processes increased polyphenols concentrations. The authors also observed higher free radical scavenger capacity in boiled and grilled samples.26 The amount of total polyphenols was much greater in the present study, i.e., 1,540 mg/100 g EF, probably due to the longest period during which the eggplants were exposed to heat at a constant temperature of approximately 70 ºC.

It is important to highlight that the polyphenols commonly present in the human diet are not necessarily the most active within the body. This fact is due to low bioavailability, since they are little absorbed by the intestine, highly metabolized, or eliminated quickly. Furthermore, the metabolites found in blood and specific organs, which result from a liver or digestive activity, may differ from ingested substances in terms of biological activity.9 Variations in phenolic content concentrations between several studies occur due to different growing conditions.27

A study assessed the hypolipidemic effect of three capsules containing 360 mg dry extract of S. melongena L. (eggplant) or 360 mg placebo/day in 28 women with dyslipidemias under nutritional control during 90 days. The authors concluded that the dry extract of S. melongena L. had a modest effect on lipid profile, with no hepatotoxic effect or adverse reactions; however, it should be noted that the clinical response found in the study did not reach the values established by the III Brazilian Guidelines on Dyslipidemias and Atherosclerosis.28

Freeze-dried eggplants exhibited the following phenolic acids determined through HPLC assay: caffeic; p-coumaric; ferulic; gallic; protocatechuic; and p-hydroxybenzoic. The amount of hydroxycinnamates (caffeic, ferulic, p-coumaric, and chlorogenic acids) was from 9 g/g to 12 ug/g fresh matter.29 In the present study, the EF had the following hydroxycinnamates: caffeic, ferulic, and chlorogenic acids, totaling 1,96 mg/g flour.

The major limitation of the present study is a lack of comparison between different forms of EF preparation, to analyse how it would change the composition of EF. However, it is worth mentioning that the EF was produced by hand, thus making the procedure easier, without the need of a freeze dryer, or difficult-to-access equipment. An electric oven is sufficient, allowing low-cost access to nutrients and phenolic compounds present in this flour.

The present study demonstrates that EF is a good addition to the diet of the general population, since it is a source of fiber, minerals, phenolic compounds, saponins, ascorbic acid, tyrosine, and phenolic acids, in addition to exhibiting an important antioxidant activity observed by means of in vitro assays. However, it is observed that although several studies have assessed the eggplant in different ways, the studies on EF are limited to inserting it mixed with other flours to prepare cakes and cookies. No studies were found that had actually assessed the effect of EF on humans in order to know if it would have some hypolipidemic effect or could reduce oxidative stress. Clinical trials are needed to answer these questions.

Conclusion

The EF analyzed exhibited high fiber content and low lipid content. Also, it had good mineral content, highlighting manganese, zinc, and copper, in addition to phenolic compounds and saponins with important in vitro antioxidant capacity. In view of the results, the EF is a good addition to the diet of the population, since it enriches the diet and brings health benefits.

Sources of Funding

This study was funded by the CAPES social demand grant.

Study Association

This article is part of thesis of Doctoral submitted by Mauara Scorsatto, from Faculdade de Medicina da Universidade Federal do Rio de Janeiro.

Acknowledgments

We are thankful to: Stan Kubow, PhD. of School of Dietetics and Human Nutrition - McGill, Montreal, Canada. Lucia Maria Jaeger, PhD. of Pharmacy College - UFRJ, Rio de Janeiro, Brazil. Anderson Junger Teodoro of the Department of Food Technology - UNIRIO, Rio de Janeiro, Brazil. Rodrigo Araújo Gonçalves of the Atomic Spectrophotometry Laboratory - PUC, Rio de Janeiro, Brazil. Longevid® Company for providing all the information related to the preparation of eggplant flour.

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19 Burits M, Bucar F. Antioxidant activity of Nigella sativa essential oil. Phytother Res. 2000;14(5):323-8.

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Phytother Res. 2000 14 5 323 328

20 Pulido R, Bravo L, Saura-Calixto F. Antioxidant activity of dietary polyphenols as determined by a modified ferric reducing/antioxidant power assay. J Agric Food Chem. 2000;48(8):3396-402.

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J Agric Food Chem 2000 48 8 3396 3402

21 Cipriano G Jr, Neves LM, Cipriano GF, Chiappa GR, Borghi-Silva A. Cardiovascular disease prevention and implications for worksite health promotion programs in Brazil. Prog Cardiovasc Dis. 2014;56(5):493-500.

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22 Possetti T, Dutra MB. Produção, composição centesimal e qualidade microbiológica de farinha de berinjela (Solanum melongena, L.). Enciclopédia Biosfera. 2011;7(13):1514-8.

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Produção, composição centesimal e qualidade microbiológica de farinha de berinjela (Solanum melongena, L.)

Enciclopédia Biosfera 2011 7 13 1514 1518

23 Heras I, Alvis A, Arrazola G. Optimización del proceso de extracción de antocianinas y evaluación de la capacidad antioxidante de berenjena (Solanum melongena L.). Información Tecnológica. 2013;24(5):93-102.

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Optimización del proceso de extracción de antocianinas y evaluación de la capacidad antioxidante de berenjena (Solanum melongena L)

Información Tecnológica 2013 24 5 93 102

24 Oliveira MS, Dors GC, Souza-Soares LA, Badiale-Furlong E. Atividade antioxidante e antifúngica de extratos vegetais. Alim Nutr (Araraquara). 2007;18(3):267-75.

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Atividade antioxidante e antifúngica de extratos vegetais

Alim Nutr (Araraquara) 2007 18 3 267 275

25 Guimarães PR, Galvão AM, Batista CM, Azevedo GS, Oliveira RD, Lamounier RP, et al. Eggplant (Solanum melongena) infusion has a modest and transitory effect on hypercholesterolemic subjects. Braz J Med Biol Res. 2000;33(9):1027-36.

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Eggplant (Solanum melongena) infusion has a modest and transitory effect on hypercholesterolemic subjects

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26 Lo Scalzo R, Fibiani M, Mennella G, Rotino GL, Dal Sasso M, Culici M, et al. Thermal treatment of eggplant (Solanum melongena L.) increases the antioxidant content and the inhibitory effect on human neutrophil burst. J Agric Food Chem. 2010;58(6):3371-9.

Lo Scalzo

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Dal Sasso

Culici

Thermal treatment of eggplant (Solanum melongena L.) increases the antioxidant content and the inhibitory effect on human neutrophil burst.

J Agric Food Chem 2010 58 6 3371 3379

27 Luthria D, Singh AP, Wilson T, Vorsa N, Banuelos GS, Vinyard B. Influence of conventional and organic agricultural practices on the phenolic content in eggplant pulp: plant-to-plant variation. Food Chem. 2010;121:406-11.

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28 Gonçalves MC, Diniz MF, Dantas AH, Borba JD. Modesto efeito hipolipemiante do extrato seco de berinjela (Solanum melongena L.) em mulheres com dislipidemias, sob controle nutricional. Rev Bras Farmacogn. 2006;16(supl):656-63.

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Modesto efeito hipolipemiante do extrato seco de berinjela (Solanum melongena L.) em mulheres com dislipidemias, sob controle nutricional

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29 Kowalski R, Kowalska G. Phenolic acid contents in fruits of aubergine (Solanum melongena L.) Pol J Food Nutr Sci. 2005;14(1):37-42.

Kowalski

Kowalska

Phenolic acid contents in fruits of aubergine (Solanum melongena L.)

Pol J Food Nutr 2005 14 1 37 42

Artigos Originais

Avaliação de Compostos Bioativos, Composição Físico-Química e Atividade Antioxidante In Vitro da Farinha de Berinjela

Scorsatto

Mauara

1 Pimentel

Aline de Castro

1 Silva

Antonio Jorge Ribeiro da

2 Sabally

Kebba

4 Rosa

Glorimar

3 Oliveira

Gláucia Maria Moraes de

1 Programa de Pós-gradução em Medicina/Cardiologia - Universidade Federal do Rio de Janeiro 2 Instituto de Pesquisa de Produtos Naturais - Universidade Federal do Rio de Janeiro 3 Instituto de Nutrição Josué de Castro - Universidade Federal do Rio de Janeiro Rio de Janeiro, RJ - Brasil 4 School of Dietetics and Human Nutrition - McGill Montreal - Canadá

Correspondência: Gláucia Maria Moraes de Oliveira, Hospital Universitário Clementino Fraga Filho - UFRJ. Rua Prof. Rodolpho P. Rocco, 255 8º andar, sala 6, Cidade Universitária. CEP: 21941-913, Rio de Janeiro, RJ - Brasil. E-mail: glauciam@cardiol.br

Contribuição dos autores

Concepção e desenho da pesquisa: Scorsatto M, Silva AJR, Rosa G, Oliveira GMM. Obtenção de dados: Scorsatto M, Pimentel AC, Sabally K. Análise e interpretação dos dados: Scorsatto M, Pimentel AC, Sabally K. Análise estatística: Scorsatto M, Silva AJR, Sabally K. Obtenção de financiamento: Rosa G, Oliveira GMM. Redação do manuscrito: Scorsatto M. Revisão crítica do manuscrito quanto ao conteúdo intelectual importante: Scorsatto M, Silva AJR, Rosa G, Oliveira GMM. Supervisão/como investigador principal: Scorsatto M, Rosa G, Oliveira GMM.

Potencial Conflito de Interesse

Declaro não haver conflito de interesses pertinentes.

Resumo Fundamento:

A berinjela (Solanum melongena) é um fruto de consumo mundial. Seu processamento em forma de farinha é uma maneira de evitar perdas e aproveitar suas características nutricionais.

Objetivos:

Este estudo avaliou a composição físico-química (umidade, proteínas, lipídeos, fibra bruta, carboidratos, minerais, niacina, saponinas, acidez titulável, fibra alimentar e fenóis totais) da farinha de berinjela preparada a partir do fruto inteiro desidratado em estufa.

Métodos:

Avaliou-se a atividade antioxidante in vitro usando os seguintes ensaios: radical 2,2-difenil-1-picrilhidrazila (DPPH); poder antioxidante de redução do ferro (FRAP); e análise de polifenóis com Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE - ácido clorogênico, ácido cafeico, ácido ferúlico e rutina).

Resultados:

Verificou-se a presença de: 23,09% de carboidratos; 13,34% de proteínas; 1,85% de lipídeos; 39,19% de fibras totais; 1.540 mg/100 g de compostos fenólicos solúveis totais; 840 mg/100 g de saponinas; minerais (potássio, magnésio, cobre, ferro, zinco, manganês); e niacina. Observou-se atividade antioxidante in vitro para DPPH (455,6 mg de ácido ascórbico/100 g) e FRAP (486,8 mg de ácido ascórbico/100 g). A CLAE determinou a presença de ácido ascórbico, tirosina e ácidos fenólicos (ácido clorogênico, ácido cafeico e ácido ferúlico).

Conclusão:

A farinha de berinjela tem alto teor de fibra além de bom teor de compostos fenólicos e saponinas com importante capacidade antioxidante observada através de ensaios in vitro. A farinha de berinjela é uma boa opção para ser adicionada à dieta da população, devido aos seus potenciais benefícios à saúde.

Palavras-chave: Solanum Melongena Antioxidantes Alimentos Dieta Nutrição Compostos Fenólicos Hiperlipidemias

Introdução

A berinjela (Solanum melongena) é um fruto de consumo mundial e comumente cultivado em regiões subtropicais e tropicais. Originária da Índia, foi introduzida no Brasil pelos portugueses no século 16.1 É atualmente cultivada por pequenos produtores em quase todo o território brasileiro; entretanto, sua produção sofre grandes perdas durante o período da safra devido ao excesso de oferta.2

A berinjela é boa fonte de minerais e vitaminas. Além de rica em fibras e baixo teor lipídico, contém uma variedade de fitoquímicos, como polifenóis, que conferem importantes benefícios à saúde.3 Seu processamento em forma de farinha é uma maneira de evitar perdas e aproveitar suas características nutricionais. A farinha de berinjela (FB) é um ingrediente alimentar muito útil para o enriquecimento da dieta; entretanto, há poucos dados sobre sua composição química.4

Estudos mostraram que os compostos fenólicos da berinjela podem reduzir a absorção da glicose intestinal e fornecer proteção antioxidante celular, evitando a oxidação e as complicações do diabetes,5 em especial aqueles compostos fenólicos presentes na casca da berinjela.6 Além disso, a casca da berinjela é rica em antocianinas e pode ser usada no tratamento de hiperlipidemia e na prevenção de doenças cardiovasculares aterogênicas através da inibição da peroxidação lipídica.7 Gonçalves et al.8 realizaram uma revisão da literatura com 25 artigos sobre a S. melongena, tendo concluído que essa espécie tem efeito de amenizar a dislipidemia, em particular hipercolesterolemia, quando usada na forma de suco do fruto com casca.

Métodos de cocção tendem a reduzir o teor de polifenóis em frutas, legumes e verduras, apenas por remover suas cascas, uma vez que essas substâncias tendem a se concentrar nas partes externas dos vegetais.9 Embora vários estudos tenham abordado a berinjela em suas diferentes formas (in natura, sucos, chás, extratos), são raros aqueles que apresentam uma ampla análise da FB produzida a partir do fruto inteiro desidratado em estufa. Os autores consideram tal processo mais acessível ao público em geral do que o de liofilização.

Este estudo visou a avaliar a composição físico-química da FB preparada a partir do fruto inteiro desidratado em estufa, caracterizando qualitativa e quantitativamente compostos fenólicos, niacina e saponinas, além de avaliar a atividade antioxidante in vitro usando os ensaios radical 2,2-difenil-1-picrilhidrazila (DPPH) e poder antioxidante de redução do ferro (FRAP).

Material e Método Padrões e reagentes

Os reagentes da cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e os padrões de ácido clorogênico 3878, ácido cafeico 0625, ácido ferúlico 12,870 e rutina 5143 foram comprados da Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, EUA). As amostras foram analisadas com um sistema CLAE Varian, com uma bomba de gradiente terciária, um detector de absorção UV/VIS de comprimento de onda variável e um amostrador automático com compartimento refrigerado (Varian Canada Inc., Mississauga, ON, Canadá). O reagente Folin-Denis (Fluka) foi comprado da Sigma-Aldrich Brasil LTDA.

Preparação das amostras

As amostras de FB usadas para análise foram adquiridas em estabelecimentos comerciais do município do Rio de Janeiro, Brasil. Segundo informação dos fabricantes, as berinjelas produzidas no estado do Rio de Janeiro foram higienizadas, fatiadas e desidratadas em estufa a uma temperatura entre 62°C e 70°C por cerca de 10 horas. Em seguida, foram acondicionadas em recipientes vedados até completo resfriamento, tendo sido moídas e imediatamente embaladas no dia seguinte. O resultado final foi um pó de cor bege escuro. As amostras de diferentes lotes foram homogeneizadas e as análises realizadas em triplicata.

Análise físico-química

O teor de umidade foi determinado pela perda de peso em estufa regulada a 105 °C até peso constante.10 O resíduo mineral fixo (RMF) foi determinado com base na queima de matéria orgânica em mufla a 550ºC até que as cinzas ficassem brancas ou levemente acinzentadas. A obtenção das cinzas permitiu a análise de minerais específicos, por serem compostas de macro- e micronutrientes e elementos-traço.10

As proteínas foram determinadas pelo processo de digestão Kjeldahl, em que a matéria orgânica é decomposta pelo ácido sulfúrico, sendo o nitrogênio transformado em amônia.10

Os lipídeos foram determinadas através de extração continua com éter dietílico em aparelho de Soxhlet, seguindo-se remoção do éter por evaporação.10

O teor de fibra bruta foi analisado em digestor industrial (Marconi MA-444/CI), submetendo-se as amostras a digestão ácida com solução de ácido sulfúrico a 1,25%, seguida de digestão alcalina com hidróxido de sódio a 1,25%.10

Estimaram-se os carboidratos totais por diferença, subtraindo-se de 100 os valores obtidos para umidade, proteínas, lipídeos, cinzas e fibras.

A acidez titulável total (ATT) foi determinada pela titulação com NaOH 0,1 N, usando-se solução alcoólica de fenolftaleína para evidenciar alteração de cor.10

A fibra alimentar total foi determinada pelo método proposto por Prosky et al.,11 além de fibra alimentar solúvel e insolúvel.12^,13

Os minerais (K, Ca, Na, Mg, Cu, Fe, Mn e Zn) foram determinados por espectrofotometria de absorção atômica, usando-se um espectrofotômetro Analytik Jena (Modelo ContrAA® 700).

As concentrações de niacina foram determinadas usando-se o método proposto por Horwitz et al.14

Os fenóis totais foram determinados usando-se o reagente de Folin-Ciocalteu.15

O teor de saponinas foi determinado usando-se o método de extração gravimétrica de duplo solvente descrito por Harborne.16^,17

Atividade antioxidante <italic>in vitro</italic> Extração da amostra<xref ref-type="bibr" rid="B18">18</xref>

A FB foi pesada (500 mg) e colocada em tubos plásticos de 15 mL, aos quais se adicionaram 10 mL de metanol a 80%. A mistura foi agitada vigorosamente com um misturador de vortex por dois minutos. As amostras foram então centrifugadas a 5000 rpm por 15 minutos, sendo o sobrenadante filtrado com papel de filtro Whatman (0,45 µm). O resíduo foi novamente extraído duas vezes com mais 10 mL de metanol a 80%. Os três extratos foram combinados para os ensaios de DPPH e FRAP e análise dos ácidos fenólicos por CLAE.

Método de sequestro do radical livre DPPH<xref ref-type="bibr" rid="B19">19</xref> Poder antioxidante de redução de ferro<xref ref-type="bibr" rid="B20">20</xref> Análise dos ácidos fenólicos e flavonoides através de CLAE

As amostras foram analisadas usando-se uma coluna (100 x 4,5 mm - Phenomenex, CA, EUA) de fase reversa (RP)-HPLC Gemini-NX, com vazão de solvente de 1 mL/min e detecção a 215 nm. O gradiente de eluição foi feito com uma mistura dos seguintes solventes: solvente A: 0,05% de ácido trifluoroacético (TFA) em 10% de acetonitrila (ACN) aquosa; e solvente B: 0,05% de TFA em 60% de ACN aquosa (v/v), iniciando com 100% de solvente A e alcançando 40% de solvente A e 60% de solvente B em 30 minutos.

Os ácidos fenólicos e os flavonoides foram identificados por comparações com os tempos de retenção (TR) e espectros UV de padrões autênticos analisados sob idênticas condições analíticas. Analisaram-se ácido ascórbico, tirosina, ácido clorogênico, ácido cafeico, ácido ferúlico e rutina. Os mesmos padrões foram usados para curvas de calibração para quantificar tais substâncias na FB. Os resultados são apresentados como média e desvio-padrão.

Análise estatística

Os dados foram expressos como média ± desvio-padrão para as variáveis contínuas. Análise de regressão linear foi conduzida para estimar ácido ascórbico, tirosina e ácidos fenólicos na FB, após análise de hipóteses para uso da análise de regressão. A análise estatística foi feita com o programa Statistical Package for Social Sciences, versão 21 (SPSS Inc., Chicago, IL, EUA).

Resultados

A Tabela 1 apresenta os resultados da composição centesimal, enquanto a Tabela 2 mostra os resultados de minerais, niacina, compostos fenólicos solúveis e saponinas.

Tabela 1 Composição centesimal da farinha de berinjela

Composição centesimal (g)	Média ± desvio-padrão
Kcal	162,37 ± 11,65
Carboidratos totais¹	23,09 ± 0,50
Proteínas	13,34 ± 0,50
Lipídeos	1,85 ± 0,03
Fibra alimentar total	39,19 ± 0,08
Fibra alimentar solúvel	10,36 ± 0,17
Fibra alimentar insolúvel	28,83 ± 0,10
Cinzas	4,70 ± 0,04
Umidade	11,89 ± 0,34

Calculado por diferença.

Tabela 2 Minerais, niacina, compostos fenólicos e saponinas presentes na farinha de berinjela

mg/100 g	Média ± desvio-padrão
Potássio	2396,0 ± 83,8
Magnésio	158,1 ± 1,1
Sódio	68,1 ± 1,4
Cobre	1,0 ± 0,03
Ferro	2,9 ± 0,06
Manganês	2,5 ± 0,03
Cálcio	130,9 ± 2,2
Zinco	2,1 ± 0,01
Niacina	1,49 ± 0,08
Compostos fenólicos solúveis totais¹	1540,0 ± 0,1
Saponinas	840 ± 0,89

Resultados expressos em termos de equivalente de ácido gálico (mg).

Atividade antioxidante <italic>in vitro</italic> Atividade de eliminação de radicais livres DPPH:

O aumento do sequestro de radicais DPPH de maneira dose-dependente devido à eliminação do extrato metanólico da FB foi de 455,6 ± 3,27 equivalentes de ácido ascórbico (mg). Resultado da determinação da atividade antioxidante realizada usando FRAP: 486,8 ± 86,8 equivalentes de ácido ascórbico (mg).

Os seguintes compostos foram detectados por ensaio CLAE: ácido ascórbico (TR = 1,06 min); tirosina (TR = 1,68 min); ácido clorogênico (TR = 7,36 min); ácido cafeico (TR = 8,57 min); e ácido ferúlico (TR = 9,24 min) (Figura 1). Informação de calibração e estimativa dos compostos fenólicos e antioxidantes presentes na FB são mostrados na Tabela 3.

Tabela 3 Informação de calibração e estimativa de ácido ascórbico, tirosina e ácidos fenólicos na farinha de berinjela

Polifenóis	Intervalo linear (µg/mL)	Curvas de calibração	r²	Média ± desvio-padrão (mg/g)
Ácido ascórbico	10-100	y = 2668,4 x – 35546	0,9921	1,73 ± 0,20
Tirosina	2-100	y = 1069,4 x – 1243,6	0,9972	1,21 ± 0,06
Ácido clorogênico	2-100	y = 6236,2 x + 12574	0,9979	1,73 ± 0,69
Ácido cafeico	2-100	y = 10415 x – 25130	0,9985	0,19 ± 0,02
Ácido ferúlico	2-100	y = 6667,9 x + 21757	0,9969	0,04 ± 0,02
Rutina	2-100	y = 1659,1 x + 4048,9	0,9964	1,73 ± 0,20

Figura 1 Compostos fenólicos e antioxidantes extraídos da farinha de berinjela: a ácido ascórbico; b tirosina; c ácido clorogênico; d ácido cafeico; e e ácido ferúlico.

Discussão

O Ministério da Saúde brasileiro mostrou um crescente interesse no desenvolvimento e promoção de estratégias de prevenção de doenças cardiovasculares, em especial o melhor controle dos fatores de risco conhecidos, como tabagismo, obesidade, sedentarismo, hiperglicemia, hipertensão e hipercolesterolemia.21 Portanto, torna-se imperativa a busca por alternativas saudáveis e de baixo custo que contribuam para a saúde da população.

O estudo conduzido por Perez e Germani4 mostrou que a FB tinha alto teor de fibra (44%). Resultado similar foi obtido por Possetti e Dutra,22 que relataram 45% de fibras, além de baixo teor de lipídeos (1,99%), 6,2% de cinzas, 25,54% de carboidratos e 8% de proteínas. Embora as fibras não forneçam nutrientes para o organismo, são essenciais na dieta por promoverem vários benefícios à saúde, sendo, portanto, a FB considerada um potencial ingrediente da alimentação.

No presente estudo, observamos 39,2% de fibras totais, 1,85% de lipídeos, 4,7% de cinzas, 23,1% de carboidratos e 13,34% de proteínas, além de um bom teor mineral, com destaque para manganês, zinco e cobre. Embora existam pequenas variações nos diferentes estudos, a FB apresenta cerca de 40% de fibras e baixo teor lipídico. Quando comparada à farinha de trigo, a FB apresentou maiores níveis de proteína, cinzas, fibras alimentares totais e açúcares totais, e menor teor de carboidrato. Portanto, o alto teor de fibra alimentar, a alta capacidade de absorção de água e a facilidade de moagem tornam a FB uma boa alternativa para misturar com a farinha de trigo. Essa farinha mista pode ser usada na preparação de produtos de panificação (biscoitos, pães, bolos e massas), expandindo o número de produtos para suplementação do aporte diário de fibras alimentares.4

Uma análise realizada com polpa de berinjela mostrou concentração de 62,5 mg de equivalentes de ácido gálico/100 g de polpa fresca.23 Esse valor é menor do que o encontrado no presente estudo com FB preparada a partir do fruto inteiro (1.540 mg de equivalentes de ácido gálico/100 g de farinha). Esse resultado é esperado, pois a casca da berinjela é rica em polifenóis e 100 g de FB representam 1.000 g do fruto. Outro estudo mostrou maior presença de fenóis totais nos extratos preparados com casca de berinjela (2.200 µg/g) em comparação aos extratos preparados com a polpa (390 µg/g).24

Um estudo que avaliou a composição centesimal do extrato de berinjela a 20% mostrou concentrações de nutrientes menores do que as encontradas no presente estudo: 0,118% de proteínas; 0,052% de cinzas; 0,0366% de lipídeos; 0,038% de fibras insolúveis; 0,025% de fibras solúveis; e 256,66 mg/dL de polifenóis totais. Embora a quantidade de polifenóis tenha sido significativa, não conseguiu proteger camundongos da oxidação do LDL-colesterol, provavelmente devido à presença de aminas biogênicas, em especial histamina. Esses resultados não justificam o uso popular do extrato de S. melongena como hipolipemiante. Entretanto, Guimarães et al.,25 avaliando o pó de S. melongena, descobriram 15,09% de proteína, 1,42% de lipídeos, 13,89% de fibras, 0,22% de cálcio e 0,31% de fósforo, tendo os testes qualitativos de composição mostrado a presença de polifenóis e saponinas. Esses resultados são semelhantes aos do presente estudo com relação a proteínas e lipídeos (13,34 e 1,85%, respectivamente), mas estão muito abaixo no que se refere às concentrações de fibras (39,19%, a concentração de fibra na FB foi 2,8 vezes maior) e de cálcio.

Um estudo sobre extratos preparados a partir da polpa e da casca da berinjela mostrou maior teor de compostos fenólicos solúveis na casca do que na polpa, sendo a capacidade de inibir o radical DPPH maior em todos os extratos de polpa de berinjela do que naqueles de casca. Esses resultados sugerem que o maior teor fenólico confere moderada atividade antioxidante ligada ao potencial de eliminação de radicais livres.5 O presente estudo mostrou semelhança entre os resultados de DPPH e FRAP, revelando a capacidade antioxidante da FB, possivelmente devido ao importante teor de compostos fenólicos.

Uma comparação entre diferentes formas de preparar a berinjela (crua, grelhada por 4 a 5 minutos nos dois lados e cozida em água por 10 minutos em calor moderado de 100ºC, todas liofilizadas após o processo) mostrou as seguintes concentrações de polifenóis totais /100 g de matéria seca: crua = 910 mg; grelhada = 1.803 mg; e cozida = 1.991 mg. As concentrações de ácido clorogênico foram: 154 mg; 549 mg; e 439 mg, respectivamente; as de ácido cafeico foram: 12,8 mg; 23,3 mg; e 33,9 mg. Portanto, os processos de grelhar e cozinhar aumentaram as concentrações de polifenóis. Além disso, os autores observaram maior capacidade sequestrante de radicais livres nas amostras cozida e grelhada.26 A quantidade de polifenóis totais foi muito maior no presente estudo, 1.540 mg/100 g de FB, provavelmente devido ao maior tempo de exposição da berinjela ao calor à temperatura constante de aproximadamente 70ºC.

É importante ressaltar que os polifenóis comuns na alimentação humana não são necessariamente os mais ativos no organismo. Isso se deve à sua baixa biodisponibilidade, pois são pouco absorvidos no intestino, altamente metabolizados ou rapidamente eliminados. Além disso, os metabólitos encontrados no sangue e órgãos específicos, resultantes de atividade hepática ou digestiva, podem diferir das substâncias ingeridas em relação à atividade biológica.9 Variações no teor fenólico entre os diversos estudos ocorrem devido às diferentes condições de cultivo.27

Um estudo avaliou o efeito hipolipemiante de três cápsulas contendo 360 mg de extrato seco de S. melongena ou 360 mg de placebo/dia em 28 mulheres dislipidêmicas em controle nutricional por 90 dias. Os autores concluíram que o extrato seco de S. melongena tinha modesto efeito no perfil lipídico, sem qualquer efeito hepatotóxico ou reação adversa; entretanto, a resposta clínica no estudo não alcançou os valores estabelecidos nas III Diretrizes Brasileiras sobre Dislipidemias e Aterosclerose.28

As berinjelas liofilizadas apresentaram os seguintes ácidos fenólicos determinados pela CLAE: cafeico, p-cumárico, ferúlico, gálico, protocatecoico e p-hidroxibenzoico. A quantidade de hidroxicinamatos (ácidos cafeico, p-cumárico, ferúlico e clorogênico) variou de 9 g/g a 12 ug/g de matéria fresca.29 No presente estudo, a FB apresentou os seguintes hidroxicinamatos: ácidos cafeico, ferúlico e clorogênico, totalizando 1,96 mg/g de farinha.

A principal limitação do presente estudo foi a falta de comparação entre as diferentes formas de preparação da FB, para avaliar como isso alteraria a sua composição. Entretanto, vale mencionar que a FB foi produzida de maneira artesanal, o que facilitou o procedimento, sem necessitar liofilização ou equipamento de difícil acesso. Uma estufa elétrica foi suficiente, permitindo acesso de baixo custo aos nutrientes e compostos fenólicos presentes na FB.

O presente estudo demonstra que a FB é uma boa adição à dieta da população geral, por ser uma fonte de fibras, minerais, compostos fenólicos, saponinas, ácido ascórbico, tirosina e ácidos fenólicos, além de exibir importante atividade antioxidante nos ensaios in vitro. Entretanto, embora vários estudos tenham avaliado a berinjela em diferentes formas, os estudos sobre a FB limitam-se a adicioná-la a outras farinhas para preparar bolos e biscoitos. Não se identificou nenhum estudo que tenha de fato avaliado o efeito da FB em seres humanos quanto à sua possível ação hipolipemiante ou redutora do estresse oxidativo. Ensaios clínicos fazem-se necessários para responder tais questões.

Conclusão

A FB analisada apresentou alto teor de fibras e baixo teor lipídico, além de bom conteúdo de minerais, em especial manganês, zinco e cobre, compostos fenólicos e saponinas com importante capacidade antioxidante in vitro. A FB mostrou-se uma boa adição para a dieta da população, pois enriquece a alimentação e confere benefícios à saúde.

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Fontes de Financiamento

O presente estudo foi financiado por Bolsa de demanda social da CAPES.

Vinculação Acadêmica

Este artigo é parte da tese de doutorado de Mauara Scorsatto pela Faculdade de Medicina da Universidade Federal do Rio de Janeiro.

Agradecimentos

Somos gratos a: Stan Kubow, PhD da School of Dietetics and Human Nutrition - McGill, Montreal, Canadá; Lucia Maria Jaeger, PhD da Faculdade de Farmácia - UFRJ, Rio de Janeiro, Brasil; Anderson Junger Teodoro do Departamento de Tecnologia do Alimento - UNIRIO, Rio de Janeiro, Brasil; Rodrigo Araújo Gonçalves do Laboratório de Espectrofotometria Atômica - PUC, Rio de Janeiro, Brasil; Longevid® Company por fornecer toda a informação relacionada à preparação da farinha de berinjela.