Resveratrol provoca efeitos antiaterogênicos em um modelo animal de aterosclerose
Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG - Brasil
Caro Editor,
Lemos com grande interesse o artigo de Matos e cols.1 e gostaríamos de comentar o protocolo e os resultados
em perspectiva.
Estudos com manipulação dietética requerem a descrição dos componentes incluídos na dieta, uma vez que variam consideravelmente em dietas comerciais (especialmente antioxidantes) e podem comprometer os resultados e a reprodutibilidade do estudo2.
A ausência de um grupo de animais tratados com dieta padrão sem suplementação lipídica dificulta avaliar a predisposição do modelo animal em desenvolver aterosclerose. Esse aspecto é fundamental devido susceptibilidade diferencial da linhagem de coelho utilizada para a aterosclerose3.
Os animais controle apresentaram níveis basais de colesterol total e triglicerídeos significativamente elevados comparado ao grupo tratado com resveratrol (58% e 72%, respectivamente). Combinando tais resultados com a falta de significância estatística dos parâmetros bioquímicos ao final do experimento, parece improvável que o resveratrol seja capaz de inibir a formação de lesões ateroscleróticas sem alterar os parâmetros lipídicos no soro dos animais tratados. Além disso, a análise morfométrica realizada não representa um bom indicador da evolução de processos ateroscleróticos, uma vez que o número e a área total destas lesões é um parâmetro mais confiável4.
Assim, sugerimos que os resultados são difíceis de interpretar com base nas limitações referentes à caracterização do modelo animal utilizado, características nutricionais da dieta e metodologia selecionada para avaliar as lesões ateroscleróticas.
1. Matos RS, Baroncini LA, Précoma LB, Winter G, Lambach PH, Caron EY, et al. Resveratrol causes antiatherogenic effects in an animal model of atherosclerosis. Arq Bras Cardiol. 2012;98(2):136-42.
2. Reeves PG, Nielsen FH, Fahey GC Jr. AIN-93 purified diets for laboratory rodents: final report of the American Institute of Nutrition ad hoc writing committee on the reformulation of the AIN-76A rodent diet. J Nutr. 1993;123(11):1939-51.
3. Thiery J, Nebendahl K, Rapp K, Kluge R, Teupser D, Seidel D. Low atherosclerotic response of a strain of rabbits to diet-induced hypercholesterolemia. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 1995;15(8):1181-8.
4. Joseph SB, McKilligin E, Pei L, Watson MA, Collins AR, Laffitte BA, et al. Synthetic LXR ligand inhibits the development of atherosclerosis in mice. Proc Natl Acad Sci U S A. 2002;99(11):7604-9.
Primeiramente, gostaria de agradecer o interesse em nosso artigo e as questões pertinentes levantadas. Essas foram nossas dúvidas também. Este trabalho faz parte de nossa linha pesquisa em modelo animal (coelhos) submetidos à dieta hipercolesterolêmica e tratados na sequência com alimentos funcionais (linhaça e resveratrol)1. Em nossa linha de pesquisa também trabalhamos com medicamentos e lesão arterial em coelhos hipercolesterolêmicos2,3. Tais modelos foram todos em coelhos cuja hipercolesterolemia foi provocada pelo produto Sigma Aldrich e em outros com ovo liofilizado. Nós possuímos em outros trabalhos o grupo controle submetido apenas à dieta normal para espécie sem adição de colesterol, mas este grupo não foi incluído no presente estudo.
Quanto ao fato de as medidas basais de colesterol, HDL colesterol, LDL colesterol e triglicerídeos serem maiores no grupo controle nós respondemos esta questão para os revisores. Os animais foram selecionados com já aproximadamente um mês de vida e, a partir daí, randomizados para receber resveratrol ou grupo controle. Não temos controle sobre a dieta desses animais antes do experimento e inferimos que deva ter sido a dieta normal para a espécie. Embora as dosagens iniciais de colesterol total e triglicerídeos tenham sido diferentes entre os grupos (não afastamos a possibilidade de alguma influência da técnica de mensuração laboratorial e que as coletas tenham sido feitas em dias diferentes entre os grupos no início do experimento), acreditamos que tais diferenças iniciais não interferiram nos resultados finais do estudo. Quanto à análise morfométrica realizada, esta tem sido o padrão de nosso laboratório e foi aceito nas demais publicações internacionais citadas a seguir e também na Thrombosis Journal4.
Atenciosamente
Liz Andréa V. Baroncini
Dalton Bertolim Précoma
1. Prim CR, Baroncini LA, Précoma LB, Caron PH, Winter G, Poletti MO, et al. Effects of linseed consumption for a short period of time on lipid profile and atherosclerotic lesions in rabbits fed a hypercholesterolaemic diet. Br J Nutr. 2012;107(5):660-4.
2. Alessi A, França Neto OR, Prim C, Silva RF, Noronha L, Brofman PR, et al. Rosiglitazona e lesão vascular em coelhos hiperecolesterolêmicos: avaliação da formação neointimal. Arq Bras Cardiol. 2010;95(3):283-8.
3. Sturzeneker MC, Ioshii SO, Villela Baroncini LA, Précoma DB. Olmersartan severely weakened the development of NASH in an animal model of hypercholesterolemia. Atherosclerosis. 2011;216(1):97-102.
4. Alessi A, França Neto OR, Brofman PR, Prim CR, Noronha L, Silva RF, et al. Use of rosiglitazone before and after vascular injury in hypercholesterolemic rabbits: assessment of neointimal formation. Thromb J. 2008;6:12.
Rômulo Dias Novaes Avenida PH Rolfs, S/N, Campus Universitário, Centro CEP 36570-000, Viçosa, MG - Brasil E-mail:
Artigo recebido em 04/03/12
Revisado em 04/03/12
Aceito em 27/03/12
Resveratrol causes antiatherogenic effects in an animal model of atherosclerosis
Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, MG – Brazil
Dear Editor,
We read with great interest the article by Matos et al.1 and would like to comment on its protocol and results.
Studies with dietary formulations require the description of all components included in the diet, because they vary considerably in commercial formulations (especially antioxidants) and might jeopardize the results and reproducibility of the study2.
The absence of a group of animals treated with a standard diet with no lipid supplementation hinders the assessment of the predisposition of the animal model to develop atherosclerosis. That is a fundamental aspect considering the differential susceptibility to atherosclerosis of the strain of rabbits used3.
The control animals had significantly increased baseline levels of total cholesterol and triglycerides as compared with those of the resveratrol-treated group (58% and 72%, respectively). Combining such results with the lack of statistical significance of the biochemical parameters at the end of the experiment, it seems unlikely that resveratrol can inhibit the formation of atherosclerotic lesions without changing the serum lipid parameters of the animals treated. In addition, the morphometric analysis performed does not represent a good indicator of the evolution of atherosclerotic processes, because the number and total area of the lesions are more reliable parameters4.
Thus, we suggest that the results are difficult to interpret based on the limitations regarding the characterization of the animal model used, nutritional characteristics of the diet and methodology selected to assess atherosclerotic lesions.
1. Matos RS, Baroncini LA, Précoma LB, Winter G, Lambach PH, Caron EY, et al. Resveratrol causes antiatherogenic effects in an animal model of atherosclerosis. Arq Bras Cardiol. 2012;98(2):136-42.
2. Reeves PG, Nielsen FH, Fahey GC Jr. AIN-93 purified diets for laboratory rodents: final report of the American Institute of Nutrition ad hoc writing committee on the reformulation of the AIN-76A rodent diet. J Nutr. 1993;123(11):1939-51.
3. Thiery J, Nebendahl K, Rapp K, Kluge R, Teupser D, Seidel D. Low atherosclerotic response of a strain of rabbits to diet-induced hypercholesterolemia. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 1995;15(8):1181-8.
4. Joseph SB, McKilligin E, Pei L, Watson MA, Collins AR, Laffitte BA, et al. Synthetic LXR ligand inhibits the development of atherosclerosis in mice. Proc Natl Acad Sci U S A. 2002;99(11):7604-9.
We would like to thank the interest in our article and the pertinent questions raised. We shared those same doubts. That study is part of our research line in an animal model (rabbits) submitted to a hypercholesterolemic diet and then treated with functional food (linseed and resveratrol)1. Within our research line we also work with medications and arterial lesions in hypercholesterolemic rabbits2,3. All such models used rabbits, whose hypercholesterolemia had been caused by either the Sigma Aldrich product or lyophilized eggs. In other studies, we had a control group receiving only a normal diet for the species with no cholesterol added, but that group was not included in the present study.
The question about the fact that the baseline measures of cholesterol, HDL cholesterol, LDL cholesterol and triglycerides were higher in the control group had already been answered to the reviewers. The animals were selected at the age of one month, being then randomized to receive resveratrol or to the control group. We had no control on the diet of those animals before the experiment and infer that it might have been the normal diet for the species. Although the initial measurements of total cholesterol and triglycerides differed between the groups (the possible influence of laboratory measuring techniques was not excluded, and the collection might have been made in different days at the beginning of the experiment), we believe that those initial differences have not interfered with the final results of the study. Regarding the morphometric analysis performed, that has been our standard procedure and has been accepted in the following international publications and in the
Sincerely,
Liz Andréa V. Baroncini
Dalton Bertolim Précoma
1. Prim CR, Baroncini LA, Précoma LB, Caron PH, Winter G, Poletti MO, et al. Effects of linseed consumption for a short period of time on lipid profile and atherosclerotic lesions in rabbits fed a hypercholesterolaemic diet. Br J Nutr. 2012;107(5):660-4.
2. Alessi A, França Neto OR, Prim C, Silva RF, Noronha L, Brofman PR, et al. Rosiglitazona e lesão vascular em coelhos hiperecolesterolêmicos: avaliação da formação neointimal. Arq Bras Cardiol. 2010;95(3):283-8.
3. Sturzeneker MC, Ioshii SO, Villela Baroncini LA, Précoma DB. Olmersartan severely weakened the development of NASH in an animal model of hypercholesterolemia. Atherosclerosis. 2011;216(1):97-102.
4. Alessi A, França Neto OR, Brofman PR, Prim CR, Noronha L, Silva RF, et al. Use of rosiglitazone before and after vascular injury in hypercholesterolemic rabbits: assessment of neointimal formation. Thromb J. 2008;6:12.
Rômulo Dias Novaes Avenida PH Rolfs, S/N, Campus Universitário, Centro Postal Code 36570-000, Viçosa, MG – Brazil E-mail:
Manuscript received March 4, 2012
Manuscript revised March 4, 2012
Accepted March 27, 2012