Arq Bras Cardiol abc Arquivos Brasileiros de Cardiologia Arq. Bras. Cardiol. 0066-782X 1678-4170 Sociedade Brasileira de Cardiologia - SBC jPymGdCHFFFJW8Sz8tjJWTg S0066-782X2023000800306 00306 10.36660/abc.20220598 Artigo Original Ácido Esteárico (mas não o Ácido Palmítico) está Associado a Biomarcadores Inflamatórios e de Disfunção Endotelial em Indivíduos em Risco Cardiovascular Gonçalinho Gustavo Henrique Ferreira Obtenção de dados Análise e interpretação dos dados Análise estatística e Redação do manuscrito e Revisão crítica do manuscrito quanto ao conteúdo intelectual importante 1 Sampaio Geni Rodrigues Obtenção de dados Análise e interpretação dos dados 1 0000-0001-7955-656X Soares-Freitas Rosana Aparecida Manólio Obtenção de dados Análise e interpretação dos dados 1 Damasceno Nágila Raquel Teixeira Concepção e desenho da pesquisa e Obtenção de financiamento Obtenção de dados 1 Universidade de São Paulo Departamento de Nutrição São Paulo SP Brasil Universidade de São Paulo – Departamento de Nutrição , São Paulo , SP – Brasil Correspondência: Gustavo Henrique Ferreira Gonçalinho • Universidade de São Paulo Instituto do Coração – Cardiologia – Av. Dr. Enéas Carvalho de Aguiar, 44. CEP 05403-900, Cerqueira César, São Paulo, SP – Brasil E-mail: gustavo.goncalinho@usp.br

Potencial conflito de interesse

Não há conflito com o presente artigo.

 01 09 2023 2023 120 8 e20220598 31 08 2022 22 05 2023 14 06 2023 This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License, which permits unrestricted use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited. Resumo Fundamento

Vários estudos têm associado o consumo de ácidos graxos saturados (AGSs) com risco cardiovascular, mas ainda existem muitas controvérsias. A maioria desses estudos avaliou os efeitos do ácido palmítico sobre lipídios circulantes. O ácido esteárico geralmente apresenta um efeito neutro sobre os lipídios sanguíneos, mas faltam estudos clínicos avaliando sua relação com marcadores de inflamação e de disfunção endotelial.

 Objetivos

Avaliar a associação de AGSs das hemácias (ácido palmítico e ácido esteárico) com biomarcadores inflamatórios e de disfunção endotelial circulantes.

 Métodos

Estudo transversal que incluiu 79 adultos de ambos os sexos com pelo menos um fator de risco cardiovascular, mas sem eventos prévios (infarto agudo do miocárdio ou acidente vascular cerebral). Biomarcadores plasmáticos – lipídios, marcadores glicometabólicos, proteína C ultrassensível (PCR-us), Interleucina 6 (IL-6), Interleucina 10 (IL-10), Fator de Necrose Tumoral-α (TNF-α), Proteína quimioatraente de Monócitos 1 (MCP-1) – e ácidos graxos das hemácias (ácidos palmítico e esteárico) foram analisados. As associações foram avaliadas por análises de correlações e regressões lineares múltiplas, com significância estatística estabelecida em p<0,05.

 Resultados

O ácido palmítico não apresentou associações com fatores de risco cardiovasculares ou com marcadores inflamatórios. Por outro lado, o ácido esteárico foi inversamente correlacionado com PCR-us, IL-6 e TNF-α, mas independentemente associado com PCR-us, IL-6, e TNF-α.

 Conclusão

O ácido esteárico está associado com biomarcadores inflamatórios e disfunção endotelial em indivíduos com um ou mais fatores de risco cardiovascular.

 Ácidos Graxos Endotélio Inflamação Biomarcadores Doenças Cardiovasculares CAPES 8882.330835/2019-1 FAPESP 2016/24531-3 FAPESP 2011/12523-2 Fontes de financiamento: O presente estudo foi financiado pela CAPES nº 8882.330835/2019-1 e FAPESP nº 2016/24531-3 e 2011/12523-2. Introdução

O papel da inflamação nas doenças cardiovasculares (DCVs) tem ganhado bastante ênfase na literatura. Pacientes em terapia hipolipemiante intensiva com estatinas, ezetimiba, e inibidores de PCSK9 podem apresentar o chamado “risco inflamatório residual”, no qual pacientes com níveis mais altos de marcadores inflamatórios, tais como fator de necrose tumoral-α (TNF-α), interleucina-6 (IL-6) e proteína C reativa (PCR), mesmo com redução dos níveis de colesterol, podem apresentar mais eventos cardiovasculares em comparação a pacientes com níveis mais baixos. 1 Vários biomarcadores de inflamação foram associados com a incidência, a prevalência, a gravidade, e o prognóstico de DCVs. Eles podem refletir a DCV de uma perspectiva diferente daquela de fatores de risco tradicionais, uma vez que muitos estudos mostraram independência na associação desses marcadores. 2 Ainda, o aumento desses marcadores inflamatórios circulantes foi associado com níveis elevados de molécula de adesão celular vascular-1 (VCAM-1), molécula de adesão intercelular-1 (ICAM-1), e E-selectina, indicadores de disfunção endotelial. Tal fato pode explicar a relação entre inflamação e DCV; 3 , 4 assim, marcadores inflamatórios como PCR e IL-6 também podem indicar disfunção endotelial. 2 - 4

A evidência atual sugere que a ingestão elevada de ácidos graxos saturados (AGSs) está associada a um risco cardiovascular aumentado, 5 e limitar o consumo de AGSs para redução desse risco é ainda recomendado pelas diretrizes de nutrição da American Heart Association 6 e da Sociedade Brasileira de Cardiologia. 7 Os mecanismos pelos quais os AGSs contribuem para a progressão da aterosclerose incluem principalmente o aumento nos níveis sanguíneos de colesterol total, lipoproteína de baixa densidade (LDL), e triglicerídeos, 8 e a inflamação. 9 - 11

Entre os mecanismos relatados na literatura, mostrou-se que os AGSs são ativadores de receptores do tipo Toll (TLRs) em macrófagos, ativando a via de sinalização inflamatória e, subsequentemente, disfunções imunometabólicas encontradas nas doenças cardiometabólicas. 12 Evidência clínica de como os AGSs influenciam a inflamação e consequentemente o risco cardiovascular permanece controverso devido aos diferentes métodos aplicados, 12 e faltam estudos sobre a influência desse AGS sobre biomarcadores da função endotelial e inflamação. 12 Inquéritos alimentares, comumente usados em estudos que avaliaram os efeitos dos AGSs sobre a saúde, contêm vários vieses, e os ácidos graxos das hemácias têm sido usados como biomarcadores do estado nutricional desses nutrientes, 13 podendo fornecer evidências mais consistentes sobre como os AGSs estão associados com inflamação e função endotelial em humanos.

Assim, o objetivo do presente estudo é avaliar a associação dos AGSs das hemácias (ácidos palmítico e esteárico) com biomarcadores circulantes da inflamação e disfunção endotelial em indivíduos com fatores de risco cardiovasculares, mas sem DCV estabelecida.

 Métodos Delineamento e participantes do estudo

Este foi um estudo transversal dos dados basais do ensaio clínico CARDIONUTRI ((ReBEC: RBR-2vfhfv). Os participantes foram recrutados do ambulatório do hospital da Universidade de São Paulo. Os critérios de inclusão foram indivíduos de ambos os sexos, idade entre 30 e 74 anos, com ao menos um fator de risco cardiovascular, e sem eventos cardiovasculares prévios (infarto agudo do miocárdio ou acidente vascular cerebral). Os critérios de exclusão foram indivíduos com doenças agudas ou doenças crônicas graves, doenças infecciosas, mulheres grávidas e/ou lactantes. Os indivíduos rastreados passaram por uma breve entrevista por telefone para avaliação dos critérios de inclusão e exclusão. Ainda, os indivíduos foram submetidos a uma eletrocardiografia conduzida por um cardiologista, e aqueles com alterações sugestivas de eventos cardiovasculares prévios foram excluídos. Um total de 374 indivíduos foram recrutados para o estudo em 2011 e 2012. Dois indivíduos recusaram a participar após serem informados sobre o delineamento do estudo. Quatorze pacientes foram excluídos por apresentarem alterações no eletrocardiograma e dois por diagnóstico recente de infecção pelo HIV. Ao final do recrutamento, 356 indivíduos foram incluídos no ensaio CARDIONUTRI. Para a análise do presente estudo, foram incluídos somente pacientes com informações laboratoriais sobre marcadores inflamatórios (citoquinas plasmáticas), resultando em 79 indivíduos ( Figura 1 ).

– Gráfico do estudo.

Avaliação clínica e nutricional

A história clínica de doenças crônicas não transmissíveis e uso atual de medicamentos foram relatadas pelos pacientes. O exame físico incluiu medida do Índice de Massa Corporal (IMC), circunferência da cintura, e pressão arterial. A ingestão dietética foi obtida por três recordatórios alimentares de 24 horas e avaliada no programa Food Processor (ESHA Research, 2012), com subsequente ajuste quanto à energia. 14 O risco cardiovascular foi avaliado pelo escore de risco Framingham, 15 , 16 e os indivíduos foram classificados com risco baixo, moderado ou alto. Diabetes foi considerado um equivalente da Doença Arterial Coronariana (DAC). 17

Análise bioquímica

Amostras de sangue foram coletadas após jejum de 12 horas em tubos contendo EDTA (1.0 mg/mL), e os eritrócitos foram separados do plasma por centrifugação, e ambos congelados a -80 o C, imediatamente após a coleta. Inibidores de protease (10 µg/mL de aprotinina, 10 µg/mL de benzamidina, e 5 µg/mL de fenilmetilsulfonil) e hidroxitolueno butilado (BHT, 100 µg/mL) foram adicionados para preservar as amostras. Todas as amostras foram divididas em alíquotas para evitar ciclos repetidos de degelo e armazenados a -80 o C até as análises. Concentrações plasmáticas de colesterol total, lipoproteína de alta densidade (HDL), triglicerídeos, glicose, (Labtest Diagnostica SA, MG, Brasil), ácidos graxos não esterificados (AGNEs), apolipoproteínas (Apo) A-I e B (Wako Chemicals USA Inc., Richmond, VA, USA), e proteína C reativa ultrassensível (PCR-us) foram medidas usando kits comerciais. Valores plasmáticos de Interleucina (IL)-6, IL-10, proteína quimioatraente de monócitos 1 (MCP-1) e Fator de Necrose Tumoral-α (TNF-α) foram medidos usando um kit de ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) Bio-PlexTM Human Cytokine 17-plex (Bio-Rad Laboratories, CA, EUA). A insulina sérica foi medida pelo kit de ELISA para insulina humana (Life Technologies, NY, EUA). O LDL foi calculado usando a equação de Friedewald. 18 A sensibilidade à insulina foi medida pelo modelo de avaliação da homeostase da resistência à insulina (HOMA-IR), e resistência insulínica foi diagnosticada foi diagnosticada se os indivíduos apresentassem qualquer das seguintes condições: IMC > 28,9 Kg/m 2 , HOMA-IR >4,65, ou IMC >27,5 kg/m 2 e HOMA-IR >3,60. 19

Análise dos ácidos graxos das hemácias

A análise dos ácidos graxos de hemácias foi realizada por cromatografia gasosa conforme descrito em outro estudo. 13 Após a separação do plasma, 300mL de hemácias foram lavadas quatro vezes com 5 mL de solução salina tamponada com fosfato (PBS, pH 7,4). O precipitado foi transferido para tubos com tampas de rosca, aos quais foram adicionados 1,75 mL de metanol, 50 µL de solução padrão interna contendo ácido tetradecanóico (C13:0)/1 mL hexano, e 100 µL de cloreto de acetila. A solução foi agitada em um vórtex e aquecida em banho maria a 90 o C por uma hora. Em seguida, 1,5 mL de hexano foi adicionado, e a solução homogeneizada por um minuto. As amostras foram centrifugadas a 1500 × g, a 4 o C por dois minutos, e 800 µL do sobrenadante foi transferido para outro tubo. Essa etapa foi repetida com a adição de 750 µL de hexano. Os tubos contendo os sobrenadantes coletados foram colocados em um concentrador centrífugo a 40 o C por 20 minutos. Em seguida, ésteres metílicos de ácidos graxo foram dissolvidos em 150 µL de hexano e transferidos a um insert de vidro encaixado em um vial . No total, 19 ácidos graxos de hemácias foram descritos, os quais incluíram AGSs, ácidos graxos monoinsaturados (AGMI), e ácidos graxos poli-insaturados (AGPI). Entre os ácidos graxos de hemácias, analisamos os ácidos palmítico, esteárico, eicosanoico, docosanoico, lignocérico, palmitoleico, oleico, gondoico, erúcico, nervônico, linoleico, γ-linoleico, eicosadienoico, dihomo-γ-linolênico, araquidônico, 13,16-docosadienoico, α-linoleico, eicosapentaenoico, e ácido docosahexaenoico. No presente estudo, focamos nossas análises nos AGSs, mais especificamente nos ácidos esteárico e palmítico, os quais foram os AGSs mas predominantes nos eritrócitos.

 Análise estatística

A distribuição das variáveis foi avaliada pelo teste de Kolmogorov-Smirnov. As características das amostras são apresentadas em média e desvio padrão (DP) ou mediana e intervalo interquartil (IIQ) para as variáveis quantitativas, dependendo da distribuição das variáveis, e como frequência (n) e porcentagem (%) para as variáveis categóricas.

A relação dos AGSs com os parâmetros cardiometabólicos e citocinas foi avaliada por correlações de Pearson e de Spearman, dependendo da distribuição das variáveis.

Para avaliar a influência dos ácidos palmítico e esteárico sobre biomarcadores de inflamação, foram aplicadas múltiplas regressões lineares usando os biomarcadores inflamatórios (PCR-us, IL-6, IL-10, MCP-1, TNF-α) como variáveis dependentes, e o ácido palmítico ou esteárico como a variável independente além das variáveis de ajuste (idade, sexo, tabagismo, colesterol total, pressão arterial sistólica, glicemia e IMC). Todos os pressupostos da regressão foram preenchidos (isto é, ausência de multicolinearidade, homoscedasticidade, erros independentes e com distribuição normal, independência das variáveis de desfechos, e linearidade das variáveis).

Todos os testes foram bicaudais, com p<0,05 considerado como estatisticamente significativo, e conduzidos no programa SPSS versão 20.0.

 Resultados

As características dos participantes estão resumidas nas Tabelas 1 e S1. A amostra foi composta predominantemente por mulheres (59.5%), e a idade média foi 51,0 ± 10,3 anos. A prevalência de doenças crônicas autorrelatadas na amostra foi de 60,8 % de indivíduos com hipertensão, 52,2% de dislipidemia, e 25,3% de diabetes mellitus tipo 2.

Quanto ao escore de risco Framingham, a maioria dos participantes foi classificada como em alto risco cardiovascular (51,9%), seguido de risco moderado (34,2%) e baixo risco (13,9%). A amostra apresentou vários fatores de risco cardiovasculares, tais como valores elevados de IMC, circunferência da cintura, colesterolemia, glicemia, insulinemia, PCR-us e HOMA-IR, e baixo HDL ( Tabela 1 ).

– Características clínicas e bioquímicas dos participantes do estudo
Variáveis Média/Mediana DP/IIQ
Idade, anos 51,0 10,3
Índice de massa corporal, Kg/m 2 31,5 6,1
Circunferência da cintura, cm 101,5 13,1
Pressão arterial sistólica, mmHg 135,2 19,2
Pressão arterial diastólica, mmHg 81,8 9,9
Frequência cardíaca, bpm 67,8 13,0
Colesterol total, mg/dL 199,8 43,9
HDL-c, mg/dL 35,8 10,2
LDL-c, mg/dL 134,8 41,4
Colesterol total:HDL-c 6,0 4,0 – 7,0
Colesterol não-HDL, mg/dL 164,4 45,0
ApoA-I, mg/dL 126,9 25,7
ApoB, mg/dL 101,8 26,9
Triglicerídeos, mg/dL 129,0 94,0 – 188,0
Ácidos graxos não esterificados, mEq/dL 0,62 0,25
Glicose, mg/dL 96,0 89,0 – 108,0
Insulina, μUI/mL 17,7 8,4
HOMA-IR 4,4 2,4
PCR-us, mg/L 2,8 1,2 – 5,6
IL-6, pg/mL 5,3 3,3 – 9,0
IL-10, pg/mL 4,0 2,8 – 10,5
MCP-1, pg/mL 15,1 10,5 – 21,6
TNF-α, pg/mL 15,2 8,2 – 25,9

HDL: lipoproteína de alta densidade; LDL: lipoproteína de baixa densidade; Apo: apolipoproteína; HOMA-IR: modelo de avaliação da homeostase da resistência à insulina; IL: interleucina; PCR-us: proteína C Reativa Ultrassensível; TNF-α: fator de necrose tumoral-α, MCP-1: proteína quimioatraente de Monócitos 1; DP: desvio padrão; IIQ: intervalo interquartil.

O perfil dos ácidos graxos das hemácias está descrito na Tabela 2 . Os ácidos graxos mais abundantes foram os ácidos palmítico e esteárico. O AGMI mais abundante foi o ácido oleico (C18:1 n-9). Entre os AGPI, os mais frequentes foram o ácido linoleico e o ácido araquidônico da família n-6 e o ácido docosahexaenóico da família n-3.

– Perfil dos ácidos graxos das hemácias dos participantes do estudo
Variáveis Média/Mediana DP/IIQ
AGS, %
C16:0 (ácido palmítico) 44,02 4,87
C18:0 (ácido esteárico) 26,12 4,45
C20:0 (ácido eicosanóico) 0,73 0,18
C22:0 (ácido docosanoico) 1,29 0,51
C24:0 (ácido lignocérico) 0,27 0,14 – 0,77
AGMI, %
C16:1 n-7 (ácido palmitoleico) 0,33 0,22 – 0,76
C18:1 n-9 (ácido oleico acid) 8,99 3,71
C20:1 n-9 (ácido gondoico) 0,08 0,05 – 0,14
C22:1 n-9 (ácido erúcico) 0,14 0,10 – 0,21
C24:1 n-9 (ácido nervônico) 1,36 0,67
AGPI n-6, %
C18:2 n-6 (ácido linoleico) 4,34 1,91
C18:3 n-6 (ácido γ-linoleico) 0,17 0,12 – 0,24
C20:2 n-6 (ácido eicosadienoico) 0,10 0,07 – 0,17
C20:3 n-6 (ácido dihomo-γ-linolênico) 0,54 0,36
C20:4 n-6 (ácido araquidônico) 3,43 2,60
C22:2 n-6 (ácido 13,16-docosadienoico) 0,39 0,21
n-6 total 9,18 4,07
AGPI n-3, %
C18:3 n-3 (ácido α-linolenico) 1,64 1,01 – 2,28
C20:5 n-3 (ácido eicosapentaenoico) 0,24 0,14
C22:6 n-3 (ácido docosahexaenoico) 3,91 1,31
n-3 total 6,16 2,03

AGMI: ácidos graxos monoinsaturados; AGPI: ácidos graxos poli-insaturados; DP: desvio padrão; IIQ: intervalo interquartil.

A composição nutricional da dieta dos participantes e a sua correlação com os marcadores inflamatórios estão descritas nas Tabelas S2 e S3. O consumo médio de AGSs foi 10,2±3,9%, sendo o consumo de ácido palmítico de 6,4 ± 4,0g e o de ácido esteárico 3,0 ± 2,4 g. Não houve correlação estatisticamente significativa entre AGS dietético e marcadores inflamatórios.

As correlações entre AGS das hemácias (ácidos palmítico e esteárico) estão descritas na Tabela 3 . Colesterol total, colesterol não-HDL, razão colesterol total: colesterol HDL, apoB, e triglicerídeos correlacionaram-se inversamente com o ácido esteárico. No entanto, PCR-us, IL-6, IL-10, MCP-1 e TNF-α correlacionaram-se positivamente com o ácido esteárico.

– Correlações entre ácidos graxos das hemácias e biomarcadores cardiovasculares
Variáveis Ácido palmítico Ácido esteárico
r Valor p r Valor p
Sexo 0,079 0,490 0,197 0,082
Idade, anos 0,062 0,585 0,163 0,151
Índice de massa corporal, Kg/m 2 0,013 0,907 -0,036 0,756
Circunferência da cintura, cm 0,021 0,857 -0,076 0,506
Pressão arterial sistólica, mmHg 0,034 0,767 -0,113 0,323
Pressão arterial diastólica, mmHg 0,024 0,833 -0,151 0,184
Frequência cardíaca, bpm 0,049 0,667 0,072 0,531
Colesterol total, mg/dL* -0,032 0,779 -0,253 0,024
HDL-c, mg/dL 0,089 0,434 0,198 0,080
LDL-c, mg/dL -0,088 0,453 -0,211 0,069
Colesterol total:HDL-c -0,083 0,468 -0,330 0,003
Colesterol não-HDL, mg/dL -0,052 0,649 -0,292 0,009
ApoA-I, mg/dL 0,155 0,173 -0,023 0,843
ApoB, mg/dL 0,009 0,936 -0,290 0,009
Triglicerídeos, mg/dL* -0,011 0,927 -0,244 0,030
Ácidos graxos não esterificados, mEq/dL 0,283 0,016 -0,007 0,954
Glicose, mg/dL* -0,114 0,317 -0,034 0,768
Insulina, μUI/mL 0,133 0,298 -0,220 0,083
HOMA-IR 0,093 0,467 -0,210 0,099
PCR-us, mg/L* 0,114 0,325 0,286 0,012
IL-6, pg/mL* 0,017 0,881 0,340 0,002
IL-10, pg/mL* 0,029 0,833 0,357 0,007
MCP-1, pg/mL* 0,034 0,769 0,245 0,030
TNF-α, pg/mL* 0,009 0,938 0,364 0,002

A análise de correlação foi realizada usando o teste de Pearson para variáveis paramétricas e o teste de Spearman (*) para variáveis não paramétricas. HDL: lipoproteína de alta densidade; LDL: lipoproteína de baixa densidade; Apo: apolipoproteína; HOMA-IR: modelo de avaliação da homeostase da resistência à insulina; IL: interleucina; PCR-us: proteína C reativa ultrassensível; TNF-α: fator de necrose tumoral-α; MCP-1: proteína quimioatraente de Monócitos 1; DP: desvio padrão; IIQ: intervalo interquartil.

Nos modelos de regressão linear múltipla ( Tabela 4 ), o ácido palmítico não apresentou associação estatisticamente significativa com nenhum dos biomarcadores inflamatórios, ao passo que o ácido esteárico foi um fator independentemente associado PCR-us, IL-6, e TNF-α quando ajustado por idade, sexo, tabagismo, colesterol total, pressão arterial sistólica, glicemia e IMC.

– Associações entre ácidos graxos das hemácias e biomarcadores de inflamação e de disfunção endotelial circulantes
Variáveis dependentes R2 β SE IC95% para β Valor p
Inferior Superior
Ácido palmítico (C16:0)
PCR-us 0,079 0,165 0,162 -0,158 0,489 0,311
IL-6 0,110 0,132 1,789 -3,438 3,702 0,941
IL-10 0,127 0,728 2,134 -3,589 5,024 0,735
MCP-1 0,091 0,399 2,184 -3,957 4,756 0,855
TNF-α 0,127 0,112 1,279 -2,445 2,669 0,930
Ácido esteárico (C18:0)
PCR-us 0,162 0,545 0,194 0,157 0,933 0,007
IL-6 0,173 4,620 2,026 0,577 8,664 0,026
IL-10 0,186 4,370 2,359 -0,379 9,120 0,070
MCP-1 0,116 3,584 2,526 -1,454 8,623 0,160
TNF-α 0,194 3,230 1,443 0,345 6,116 0,029

Modelos de regressão linear múltipla ajustados por idade, sexo, tabagismo, colesterol total, pressão arterial sistólica, pressão arterial, glicemia, e índice de massa corporal. Os modelos foram compostos por uma das variáveis dependentes – Proteína C Reativa Ultrassensível (PCR-us), Interleucina-6 (IL-6), Interleucina-10 (IL-10), Proteína quimioatraente de Monócitos 1 (MCP-1) e Fator de Necrose Tumoral-α (TNF-α) e variáveis independentes (ácido palmítico ou ácido esteárico e variáveis de ajuste). IC95%: intervalo de confiança de 95%.

 Discussão

O principal achado de nosso estudo ( Figura Central ) foi que a associação independente entre ácido esteárico e biomarcadores de disfunção endotelial e inflamação, apesar das correlações inversas com lipídios aterogênicos em indivíduos com fatores de risco cardiovascular sem DCV. Ainda, o ácido palmítico não mostrou associação significativa com nenhum dos biomarcadores avaliados.

: Ácido Esteárico (mas não o Ácido Palmítico) está Associado a Biomarcadores Inflamatórios e de Disfunção Endotelial em Indivíduos em Risco Cardiovascular DCV: doença cardiovascular; PCR-us: proteína C ultrassensível; IL-6: Interleucina 6.

Limitar a ingestão de AGS para diminuir o risco cardiovascular é uma recomendação das diretrizes nutricionais recentemente publicadas. 6 , 7 Uma meta-análise de Ensaios Clínicos Randomizados (ECRs) mostrou que a ingestão de óleo de palma rico em ácido palmítico aumentou os níveis de LDL em 9mg/dL em comparação a óleos vegetais pobres em AGS. 20 Tal fato pode ser traduzido em um risco 6% maior de Doença Arterial Coronariana (DAC). 21 Outra meta-análise mostrou que uma redução no consumo de AGSs diminuiu o nível de LDL em 5mg/dL em crianças e adolescentes. 22 O mais importante, esses efeitos ocorrem quando a faixa de ingestão dos ácidos graxos encontra-se entre 20 e 30% do total de energia ingerida. Quando a ingestão de ácidos graxos é maior que 30%, a magnitude do efeito do AGS de elevar os níveis de LDL aumentou para 24 mg/dL. 20 Contudo, outros estudos mostraram fracas associações entre a ingestão de AGS e desfechos cardiovasculares. 23 , 24 Tais controvérsias poderiam ser explicadas pela substituição dos AGSs por carboidratos refinados, 25 e a comparação dos efeitos dos AGSs com os de ácidos graxos trans, gordura animal, ou óleo de coco, 20 dificultaria a avaliação do real efeito dos AGSs. Ainda, a maioria dos estudos observacionais não distinguem os efeitos do ácido palmítico e do ácido esteárico, os quais são encontrados mais no óleo de palma, e na manteiga e na banha, respectivamente. 26

Em nosso estudo, contudo, o ácido palmítico não apresentou correlação significativa com colesterol sanguíneo. Esse foi um resultado inesperado, uma vez que é sabido que o ácido palmítico aumenta os níveis de colesterol total e de LDL. 27 Embora os AGSs de hemácias reflitam a ingestão de AGS, 28 sabe-se também que carboidratos dietéticos modulam os níveis de AGSs circulantes por meio da lipogênese de novo , levando a uma discrepância entre o estado nutricional e a ingestão de AGSs. 12 A lipogênese de novo encontra-se elevada na obesidade, 12 o que poderia explicar a falta de associação entre ácidos graxos dietéticos e das hemácias, observada no presente estudo (Tabela S3). Ainda, a ingestão de ácidos graxos totais e AGSs não foi elevada (29,7 % e 10,2 % da ingestão de energia, respectivamente) e, portanto, a possibilidade de que o ácido palmítico cause hipercolesterolemia nesses níveis de ingestão é baixa. 20

Por outro lado, o ácido esteárico mostrou uma correlação inversa significativa com o colesterol total, colesterol não-HDL, apoB, e triglicerídeos. Um ECR relatou que os efeitos dos ácidos esteárico, oleico, e linoleico não apresentaram diferença, sugerindo que o ácido esteárico, diferentemente do ácido palmítico, não aumenta os níveis de LDL. 29 Uma metanálise recente mostrou que a substituição do ácido palmítico com ácido esteárico teve pouco ou nenhum efeito sobre o colesterol total, LDL, e apo B. 27 Ainda, a substituição dietética do ácido esteárico com AGMI ou AGPI não afetou sobre as concentrações de LDL, HDL, colesterol total ou triglicerídeos, diferentemente da substituição do ácido palmítico com AGMI ou AMPI. Tal fato corrobora a hipótese de que o ácido esteárico dietético pode ser menos deletério que o ácido palmítico quanto aos efeitos sobre o perfil lipídico. Assim, nossos resultados corroboram essa hipótese, uma vez que o ácido esteárico das hemácias mostrou melhor correlação com os lipídios sanguíneos em comparação ao ácido palmítico.

A associação entre AGS circulante e risco cardiovascular tem sido controversa. A metanálise de Chowdhury et al. 23 não encontraram relação entre biomarcadores do status de AGS e desfechos coronarianos. Contudo, esses resultados foram criticados, 30 uma vez que a meta-análise incluiu estudos que utilizaram diferentes frações lipídicas, que refletem a ingestão de ácidos graxos de diferentes maneiras (por exemplo, os níveis de ácidos graxos plasmáticos de jejum refletem o consumo dos últimos 3-4 dias, enquanto os níveis de ácidos graxos derivados de fosfolipídios refletem a ingestão nos últimos meses). 23 , 30 Dos oito estudos incluídos na meta-análise, 23 quatro estudos que analisaram fosfolipídios plasmáticos mostraram associações significativas com DAC e mortalidade, 31 - 34 sendo as associações mais fortes com ácido palmítico e esteárico.

Além da modulação do metabolismo das lipoproteínas, os AGSs podem influenciar o risco cardiovascular por meio da inflamação. 12 Os AGSs atuam como agonistas não microbianos do receptor do tipo Toll 4 (TLR4), ativando vias inflamatórias por meio do o fator de transcrição nuclear kappa B (NF-kB), que exerce um papel crucial na indução de mediadores inflamatórios tais como IL-1β, IL-6, MCP1, TNF-α, entre outros. 35 Os AGSs também induzem indiretamente a ativação de TLR4 por meio da produção elevada ade lipopolissacarídeos e toxinas urêmicas pela microbiota intestinal após a ingestão de uma dieta hiperlipídica. Essa endotoxemia metabólica leva a um estresse oxidativo, e à produção de lipídios aterogênicos, LDL oxidado (LDLox) e fosfolipídios oxidados – que levam à resposta inflamatória do complexo CD36-TLR4-TLR6. 35 , 36 Ainda, o consumo elevado de AGSs aumenta os níveis de lipídios, de LDL minimamente modificada e de LDLox, que ativam a via inflamatória CD14-TLR4-MD2. 35 O consumo elevado de AGSs também pode alterar a composição lipídica do HDL e a capacidade de efluxo do colesterol, diminuindo sua função e aumentando o risco cardiovascular. 37 , 38

Nosso estudo corrobora esse fato, ao mostrar que os AGSs das hemácias associam-se independentemente com marcadores inflamatórios. No entanto, essa associação restringiu-se ao ácido esteárico. Sabe-se que o ácido esteárico induz a resposta inflamatória. 35 Em uma análise de uma subamostra do PREDIMED, os AGSs plasmáticos e, especificamente, o ácido palmítico, mostraram uma associação positiva com níveis mais altos de moléculas pó-inflamatórias circulantes, particularmente IL-6. 39 Por outro lado, Voon et al. 40 mostraram que uma dieta rica em ácido palmítico não modificou os níveis de biomarcadores. Contudo, biomarcadores do status de AGSs não foram medidos no estudo. Outros estudos mostraram que AGSs totais estão associados a níveis mais elevados de marcadores inflamatórios, tais como PCR-us e IL-6, 33 , 34 , 41 , 42 e risco cardiovascular mais alto. 31 - 34 Porém, quando analisados separadamente, as associações tende a ser mais significativas e mais fortes com o ácido esteárico, sugerindo que o ácido palmítico isoladamente não altera o risco cardiovascular na mesma magnitude que o ácido esteárico. 31 - 34 , 42

Devido ao seu efeito neutro sobre o metabolismo de lipoproteínas, o ácido esteárico tem sido considerado um substituto dietético para os ácidos graxos trans visando redução no risco cardiovascular. 43 Contudo, o risco cardiovascular não se resume aos fatores de risco tradicionais principais, 13 e vários biomarcadores cardiovasculares potenciais que refletem diferentes aspectos da saúde cardiovascular tem sido estudados. 3 , 44 A associação independente do ácido esteárico das hemácias com a PCR-us, IL-6 e TNF-α encontrada em nosso estudo sugere uma ação pró-inflamatória dos ácidos graxos, que leva à disfunção endotelial e ao aumento do risco cardiovascular, independentemente dos efeitos sobre o metabolismo das lipoproteínas, corroborando estudos anteriores. 31 - 34 , 42 Contudo, a maioria dos estudos são observacionais. Um ECR recente comparando uma dieta rica em ácido palmítico e uma dieta rica em ácido esteárico mostrou que, apesar dos melhores efeitos sobre o metabolismo lipídico, o ácido esteárico aumentou os níveis de marcadores inflamatórios de baixo grau circulantes. 45 Estudos laboratoriais mostram que o ácido esteárico tem efeitos comparáveis aos do ácido palmítico em ativar a cascata de resposta inflamatória TLR4/Nf-κB. 46 Um estudo prévio mostrou que o ácido esteárico é um fator contribuinte importante para a lipotoxicidade nas células beta de camundongos, mostrando efeitos mais deletérios que o ácido palmítico na sobrevida de células beta e controle glicometabólico. 47 Entretanto, não observamos nenhuma associação entre os AGSs e marcadores glicometabólicos no estudo. Também foi demonstrado que o tratamento de macrófagos polarizados M1 com ácido esteárico aumenta sua susceptibilidade à inflamação e estresse de retículo endoplasmático por meio da inflamação independente de TLR4/2. 48 Ainda, o ácido esteárico, em concentrações fisiológicas, mas não o ácido palmítico, induz efeitos lipotóxicos sobre células angiogênicas circulantes, reduzindo, assim sua capacidade de reparo endotelial. 49 Além disso, a expressão de genes pró-inflamatórios, induzida por ácido esteárico, aumenta o estresse de retículo endoplasmático e apoptose de células angiogênicas, o que poderia estar associado com dano e disfunção vascular aumentados. 49 A associação do ácido esteárico encontrada no presente estudo também pode ser explicada por seu efeito de aumentar a atividade de estearoil-CoA 1 (SDC1), uma enzima lipogênica associada à disfunção metabólica e inflamação crônica de baixo grau, embora os mecanismos pelos quais a SCD1 aumenta a inflamação sejam desconhecidas. 50 Contudo, não avaliamos polimorfismos de nucleotídeo único ou atividade da SCD1 em nosso estudo.

Em conjunto, os resultados de nosso estudo e da literatura corroboram o efeito pró-inflamatório do ácido esteárico. Sabe-se que a PCR-us, o IL-6, e o TNF-α não são apenas marcadores do sistema de inflamação, como também biomarcadores da disfunção endotelial. 51 , 52 A disfunção endotelial é o principal marco de DCV e está associada com pior prognóstico independentemente dos fatores de risco. 1 De fato, níveis elevados de ácido esteárico podem aumentar o risco inflamatório cardiovascular, independentemente dos níveis de colesterol sanguíneo. Nosso estudo tem limitações devido à sua natureza transversal, o tamanho amostral, e a falta de desfechos clínicos. Os pontos fortes do estudo incluem o uso de ácidos graxos das hemácias como um biomarcador do status de AGS, e o uso de biomarcadores de inflamação e de disfunção endotelial. A razão pelo qual os ácidos graxos de hemácias não se correlacionaram com ácidos graxos da dieta pode ser atribuída a vários vieses inerentes aos inquéritos alimentares, sugerindo a vantagem de se utilizar biomarcadores do status de ácidos graxos, particularmente ácidos graxos das hemácias, que refletem a ingestão de ácidos graxos nos últimos três meses aproximadamente.

 Conclusões

Nossos resultados mostraram que o ácido esteárico de hemácias associa-se independentemente com biomarcadores de inflamação e de disfunção endotelial em indivíduos com um ou mais fator de risco cardiovascular.

 Agradecimentos

Os autores agradecem a Sra. Elizabeth Torres por disponibilizar o cromatógrafo a gás para o estudo.

 Referências 1. Geovanini GR , Libby P . Atherosclerosis and Inflammation: Overview and Updates . Clin Sci . 2018 ; 132 ( 12 ): 1243 - 52 . doi: 10.1042/CS20180306 . Geovanini GR Libby P Atherosclerosis and Inflammation: Overview and Updates Clin Sci 2018 132 12 1243 1252 10.1042/CS20180306 2. Pearson TA , Mensah GA , Alexander RW , Anderson JL , Cannon RO 3rd , Criqui M , et al . Markers of Inflammation and Cardiovascular Disease: Application to Clinical and Public Health Practice: A Statement for Healthcare Professionals from the Centers for Disease Control and Prevention and the American Heart Association . Circulation . 2003 ; 107 ( 3 ): 499 - 511 . doi: 10.1161/01.cir.0000052939.59093.45 . Pearson TA Mensah GA Alexander RW Anderson JL Cannon RO 3rd Criqui M et al Markers of Inflammation and Cardiovascular Disease: Application to Clinical and Public Health Practice: A Statement for Healthcare Professionals from the Centers for Disease Control and Prevention and the American Heart Association Circulation 2003 107 3 499 511 10.1161/01.cir.0000052939.59093.45 3. Wang L , Cheng CK , Yi M , Lui KO , Huang Y . Targeting Endothelial Dysfunction and Inflammation . J Mol Cell Cardiol . 2022 ; 168 : 58 - 67 . doi: 10.1016/j.yjmcc.2022.04.011 . Wang L Cheng CK Yi M Lui KO Huang Y Targeting Endothelial Dysfunction and Inflammation J Mol Cell Cardiol 2022 168 58 67 10.1016/j.yjmcc.2022.04.011 4. Taghizadeh S , Izadi A , Shirazi S , Parizad M , Pourghassem Gargari B . The Effect of Coenzyme Q10 Supplementation on Inflammatory and Endothelial Dysfunction Markers in Overweight/Obese Polycystic Ovary Syndrome patients . Gynecol Endocrinol . 2021 ; 37 ( 1 ): 26 - 30 . doi: 10.1080/09513590.2020.1779689 . Taghizadeh S Izadi A Shirazi S Parizad M Pourghassem Gargari B The Effect of Coenzyme Q10 Supplementation on Inflammatory and Endothelial Dysfunction Markers in Overweight/Obese Polycystic Ovary Syndrome patients Gynecol Endocrinol 2021 37 1 26 30 10.1080/09513590.2020.1779689 5. Hooper L , Martin N , Jimoh OF , Kirk C , Foster E , Abdelhamid AS . Reduction in Saturated Fat Intake for Cardiovascular Disease . Cochrane Database Syst Rev . 2020 ; 5 ( 5 ): CD011737 . doi: 10.1002/14651858.CD011737.pub2 . Hooper L Martin N Jimoh OF Kirk C Foster E Abdelhamid AS Reduction in Saturated Fat Intake for Cardiovascular Disease Cochrane Database Syst Rev 2020 5 5 CD011737 10.1002/14651858.CD011737.pub2 6. Lichtenstein AH , Appel LJ , Vadiveloo M , Hu FB , Kris-Etherton PM , Rebholz CM , et al . 2021 Dietary Guidance to Improve Cardiovascular Health: A Scientific Statement from the American Heart Association . Circulation . 2021 ; 144 ( 23 ): e472 - e487 . doi: 10.1161/CIR.0000000000001031 . Lichtenstein AH Appel LJ Vadiveloo M Hu FB Kris-Etherton PM Rebholz CM et al 2021 Dietary Guidance to Improve Cardiovascular Health: A Scientific Statement from the American Heart Association Circulation 2021 144 23 e472 e487 10.1161/CIR.0000000000001031 7. Izar MCO , Lottenberg AM , Giraldez VZR , Santos RDD Filho , Machado RM , Bertolami A , et al . Position Statement on Fat Consumption and Cardiovascular Health - 2021 . Arq Bras Cardiol . 2021 ; 116 ( 1 ): 160 - 212 . doi: 10.36660/abc.20201340. Izar MCO Lottenberg AM Giraldez VZR Santos RDD Filho Machado RM Bertolami A et al Position Statement on Fat Consumption and Cardiovascular Health - 2021 Arq Bras Cardiol 2021 116 1 160 212 10.36660/abc.20201340. 8. Mensink RP , Katan MB . Effect of Dietary Fatty Acids on Serum Lipids and Lipoproteins. A Meta-Analysis of 27 Trials . Arterioscler Thromb . 1992 ; 12 ( 8 ): 911 - 9 . doi: 10.1161/01.atv.12.8.911 . Mensink RP Katan MB Effect of Dietary Fatty Acids on Serum Lipids and Lipoproteins. A Meta-Analysis of 27 Trials Arterioscler Thromb 1992 12 8 911 919 10.1161/01.atv.12.8.911 9. Chait A , Kim F . Saturated Fatty Acids and Inflammation: Who Pays the Toll? Arterioscler Thromb Vasc Biol . 2010 ; 30 ( 4 ): 692 - 3 . doi: 10.1161/ATVBAHA.110.203984 . Chait A Kim F Saturated Fatty Acids and Inflammation: Who Pays the Toll? Arterioscler Thromb Vasc Biol 2010 30 4 692 693 10.1161/ATVBAHA.110.203984 10. Ajuwon KM , Spurlock ME . Palmitate Activates the NF-kappaB Transcription Factor and Induces IL-6 and TNFalpha Expression in 3T3-L1 Adipocytes . J Nutr . 2005 ; 135 ( 8 ): 1841 - 6 . doi: 10.1093/jn/135.8.1841 . Ajuwon KM Spurlock ME Palmitate Activates the NF-kappaB Transcription Factor and Induces IL-6 and TNFalpha Expression in 3T3-L1 Adipocytes J Nutr 2005 135 8 1841 1846 10.1093/jn/135.8.1841 11. Libby P , Buring JE , Badimon L , Hansson GK , Deanfield J , Bittencourt MS , et al . Atherosclerosis . Nat Rev Dis Primers . 2019 ; 5 ( 1 ): 56 . doi: 10.1038/s41572-019-0106-z . Libby P Buring JE Badimon L Hansson GK Deanfield J Bittencourt MS et al Atherosclerosis Nat Rev Dis Primers 2019 5 1 56 10.1038/s41572-019-0106-z 12. Ruiz-Núñez B , Dijck-Brouwer DA , Muskiet FA . The Relation of Saturated Fatty Acids with Low-Grade Inflammation and Cardiovascular Disease . J Nutr Biochem . 2016 ; 36 : 1 - 20 . doi: 10.1016/j.jnutbio.2015.12.007 . Ruiz-Núñez B Dijck-Brouwer DA Muskiet FA The Relation of Saturated Fatty Acids with Low-Grade Inflammation and Cardiovascular Disease J Nutr Biochem 2016 36 1 20 10.1016/j.jnutbio.2015.12.007 13. Gonçalinho GHF , Sampaio GR , Soares-Freitas RAM , Damasceno NRT . Omega-3 Fatty Acids in Erythrocyte Membranes as Predictors of Lower Cardiovascular Risk in Adults without Previous Cardiovascular Events . Nutrients . 2021 ; 13 ( 6 ): 1919 . doi: 10.3390/nu13061919 . Gonçalinho GHF Sampaio GR Soares-Freitas RAM Damasceno NRT Omega-3 Fatty Acids in Erythrocyte Membranes as Predictors of Lower Cardiovascular Risk in Adults without Previous Cardiovascular Events Nutrients 2021 13 6 1919 10.3390/nu13061919 14. Willett WC , Howe GR , Kushi LH . Adjustment for Total Energy Intake in Epidemiologic Studies . Am J Clin Nutr . 1997 ; 65 ( 4 Suppl ): 1220S - 1228S . doi: 10.1093/ajcn/65.4.1220S . doi: 10.1093/ajcn/65.4.1220S. Willett WC Howe GR Kushi LH Adjustment for Total Energy Intake in Epidemiologic Studies Am J Clin Nutr 1997 65 4 Suppl 1220S 1228S 10.1093/ajcn/65.4.1220S 15. D’Agostino RB Sr , Vasan RS , Pencina MJ , Wolf PA , Cobain M , Massaro JM , et al . General Cardiovascular Risk Profile for Use in Primary Care: The Framingham Heart Study . Circulation . 2008 ; 117 ( 6 ): 743 - 53 . doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA.107.699579 . D’Agostino RB Vasan RS Pencina MJ Wolf PA Cobain M Massaro JM et al General Cardiovascular Risk Profile for Use in Primary Care: The Framingham Heart Study Circulation 2008 117 6 743 753 10.1161/CIRCULATIONAHA.107.699579 16. Mosca L , Benjamin EJ , Berra K , Bezanson JL , Dolor RJ , Lloyd-Jones DM , et al . Effectiveness-Based Guidelines for the Prevention of Cardiovascular Disease in Women--2011 Update: A Guideline from the American Heart Association . J Am Coll Cardiol . 2011 ; 57 ( 12 ): 1404 - 23 . doi: 10.1016/j.jacc.2011.02.005 . Mosca L Benjamin EJ Berra K Bezanson JL Dolor RJ Lloyd-Jones DM et al Effectiveness-Based Guidelines for the Prevention of Cardiovascular Disease in Women--2011 Update: A Guideline from the American Heart Association J Am Coll Cardiol 2011 57 12 1404 1423 10.1016/j.jacc.2011.02.005 17. Catapano AL , Reiner Z , De Backer G , Graham I , Taskinen MR , Wiklund O , et al . ESC/EAS Guidelines for the Management of Dyslipidaemias The Task Force for the Management of Dyslipidaemias of the European Society of Cardiology (ESC) and the European Atherosclerosis Society (EAS) . Atherosclerosis . 2011 ; 217 ( 1 ): 3 - 46 . doi: 10.1016/j.atherosclerosis.2011.06.028 . Catapano AL Reiner Z De Backer G Graham I Taskinen MR Wiklund O et al ESC/EAS Guidelines for the Management of Dyslipidaemias The Task Force for the Management of Dyslipidaemias of the European Society of Cardiology (ESC) and the European Atherosclerosis Society (EAS) Atherosclerosis 2011 217 1 3 46 10.1016/j.atherosclerosis.2011.06.028 18. Friedewald WT , Levy RI , Fredrickson DS . Estimation of the Concentration of Low-Density Lipoprotein Cholesterol in Plasma, without Use of the Preparative Ultracentrifuge . Clin Chem . 1972 ; 18 ( 6 ): 499 - 502 . Friedewald WT Levy RI Fredrickson DS Estimation of the Concentration of Low-Density Lipoprotein Cholesterol in Plasma, without Use of the Preparative Ultracentrifuge Clin Chem 1972 18 6 499 502 19. Stern SE , Williams K , Ferrannini E , DeFronzo RA , Bogardus C , Stern MP . Identification of Individuals with Insulin Resistance Using Routine Clinical Measurements . Diabetes . 2005 ; 54 ( 2 ): 333 - 9 . doi: 10.2337/diabetes.54.2.333 . Stern SE Williams K Ferrannini E DeFronzo RA Bogardus C Stern MP Identification of Individuals with Insulin Resistance Using Routine Clinical Measurements Diabetes 2005 54 2 333 339 10.2337/diabetes.54.2.333 20. Sun Y , Neelakantan N , Wu Y , Lote-Oke R , Pan A , van Dam RM . Palm Oil Consumption Increases LDL Cholesterol Compared with Vegetable Oils Low in Saturated Fat in a Meta-Analysis of Clinical Trials . J Nutr . 2015 ; 145 ( 7 ): 1549 - 58 . doi: 10.3945/jn.115.210575 . Sun Y Neelakantan N Wu Y Lote-Oke R Pan A van Dam RM Palm Oil Consumption Increases LDL Cholesterol Compared with Vegetable Oils Low in Saturated Fat in a Meta-Analysis of Clinical Trials J Nutr 2015 145 7 1549 1558 10.3945/jn.115.210575 21. Gould AL , Davies GM , Alemao E , Yin DD , Cook JR . Cholesterol Reduction Yields Clinical Benefits: Meta-Analysis Including Recent Trials . Clin Ther . 2007 ; 29 ( 5 ): 778 - 94 . doi: 10.1016/j.clinthera.2007.05.012 . Gould AL Davies GM Alemao E Yin DD Cook JR Cholesterol Reduction Yields Clinical Benefits: Meta-Analysis Including Recent Trials Clin Ther 2007 29 5 778 794 10.1016/j.clinthera.2007.05.012 22. Te Morenga L , Montez JM . Health Effects of Saturated and Trans-Fatty Acid Intake in Children and Adolescents: Systematic Review and Meta-Analysis . PLoS One . 2017 ; 12 ( 11 ): e0186672 . doi: 10.1371/journal.pone.0186672 . Te Morenga L Montez JM Health Effects of Saturated and Trans-Fatty Acid Intake in Children and Adolescents: Systematic Review and Meta-Analysis PLoS One 2017 12 11 e0186672 10.1371/journal.pone.0186672 23. Chowdhury R et al . Association of Dietary, Circulating, and Supplement Fatty Acids With Coronary Risk . Ann. Intern. Med . 160 , 398 ( 2014 ). Chowdhury R et al Association of Dietary, Circulating, and Supplement Fatty Acids With Coronary Risk Ann. Intern. Med 160 398 2014 24. Souza RJ , Mente A , Maroleanu A , Cozma AI , Ha V , Kishibe T , et al . Intake of Saturated and Trans Unsaturated Fatty Acids and Risk of All Cause Mortality, Cardiovascular Disease, and Type 2 Diabetes: Systematic Review and Meta-Analysis of Observational Studies . BMJ . 2015 ; 351 : h3978 . doi: 10.1136/bmj.h3978 . Souza RJ Mente A Maroleanu A Cozma AI Ha V Kishibe T et al Intake of Saturated and Trans Unsaturated Fatty Acids and Risk of All Cause Mortality, Cardiovascular Disease, and Type 2 Diabetes: Systematic Review and Meta-Analysis of Observational Studies BMJ 2015 351 h3978 10.1136/bmj.h3978 25. Siri-Tarino PW , Sun Q , Hu FB , Krauss RM . Saturated Fatty Acids and Risk of Coronary Heart Disease: Modulation by Replacement Nutrients . Curr Atheroscler Rep . 2010 ; 12 ( 6 ): 384 - 90 . doi: 10.1007/s11883-010-0131-6 . Siri-Tarino PW Sun Q Hu FB Krauss RM Saturated Fatty Acids and Risk of Coronary Heart Disease: Modulation by Replacement Nutrients Curr Atheroscler Rep 2010 12 6 384 390 10.1007/s11883-010-0131-6 26. Gupta SV , Khosla P . Palmitic and stearic Acids Similarly Affect Plasma Lipoprotein Metabolism in Cynomolgus Monkeys Fed Diets with Adequate Levels of Linoleic Acid . J Nutr . 2001 ; 131 ( 8 ): 2115 - 20 . doi: 10.1093/jn/131.8.2115 . Gupta SV Khosla P Palmitic and stearic Acids Similarly Affect Plasma Lipoprotein Metabolism in Cynomolgus Monkeys Fed Diets with Adequate Levels of Linoleic Acid J Nutr 2001 131 8 2115 2120 10.1093/jn/131.8.2115 27. Sellem L , Flourakis M , Jackson KG , Joris PJ , Lumley J , Lohner S , et al . Impact of Replacement of Individual Dietary SFAs on Circulating Lipids and Other Biomarkers of Cardiometabolic Health: A Systematic Review and Meta-Analysis of Randomized Controlled Trials in Humans . Adv Nutr . 2022 ; 13 ( 4 ): 1200 - 25 . doi: 10.1093/advances/nmab143 . Sellem L Flourakis M Jackson KG Joris PJ Lumley J Lohner S et al Impact of Replacement of Individual Dietary SFAs on Circulating Lipids and Other Biomarkers of Cardiometabolic Health: A Systematic Review and Meta-Analysis of Randomized Controlled Trials in Humans Adv Nutr 2022 13 4 1200 1225 10.1093/advances/nmab143 28. Hodson L , Eyles HC , McLachlan KJ , Bell ML , Green TJ , Skeaff CM . Plasma and Erythrocyte Fatty Acids Reflect Intakes of Saturated and n-6 PUFA Within a Similar Time Frame . J Nutr . 2014 ; 144 ( 1 ): 33 - 41 . doi: 10.3945/jn.113.183749 . Hodson L Eyles HC McLachlan KJ Bell ML Green TJ Skeaff CM Plasma and Erythrocyte Fatty Acids Reflect Intakes of Saturated and n-6 PUFA Within a Similar Time Frame J Nutr 2014 144 1 33 41 10.3945/jn.113.183749 29. Thijssen MA , Mensink RP . Small Differences in the Effects of Stearic Acid, Oleic Acid, and Linoleic Acid on the Serum Lipoprotein Profile of Humans . Am J Clin Nutr . 2005 ; 82 ( 3 ): 510 - 6 . doi: 10.1093/ajcn.82.3.510 . Thijssen MA Mensink RP Small Differences in the Effects of Stearic Acid, Oleic Acid, and Linoleic Acid on the Serum Lipoprotein Profile of Humans Am J Clin Nutr 2005 82 3 510 516 10.1093/ajcn.82.3.510 30. Dawczynski C , Kleber ME , März W , Jahreis G , Lorkowski S . Association of Dietary, Circulating, and Supplement Fatty Acids with Coronary Risk . Ann Intern Med . 2014 ; 161 ( 6 ): 453 - 4 . doi: 10.7326/L14-5018-2 . Dawczynski C Kleber ME März W Jahreis G Lorkowski S Association of Dietary, Circulating, and Supplement Fatty Acids with Coronary Risk Ann Intern Med 2014 161 6 453 454 10.7326/L14-5018-2 31. Wang L , Folsom AR , Eckfeldt JH . Plasma Fatty Acid Composition and Incidence of Coronary Heart Disease in Middle Aged Adults: The Atherosclerosis Risk in Communities (ARIC) Study . Nutr Metab Cardiovasc Dis . 2003 ; 13 ( 5 ): 256 - 66 . doi: 10.1016/s0939-4753(03)80029-7 . Wang L Folsom AR Eckfeldt JH Plasma Fatty Acid Composition and Incidence of Coronary Heart Disease in Middle Aged Adults: The Atherosclerosis Risk in Communities (ARIC) Study Nutr Metab Cardiovasc Dis 2003 13 5 256 266 10.1016/s0939-4753(03)80029-7 32. Khaw KT , Friesen MD , Riboli E , Luben R , Wareham N . Plasma Phospholipid Fatty Acid Concentration and Incident Coronary Heart Disease in Men and Women: The EPIC-Norfolk Prospective Study . PLoS Med . 2012 ; 9 ( 7 ): e1001255 . doi: 10.1371/journal.pmed.1001255 . Khaw KT Friesen MD Riboli E Luben R Wareham N Plasma Phospholipid Fatty Acid Concentration and Incident Coronary Heart Disease in Men and Women: The EPIC-Norfolk Prospective Study PLoS Med 2012 9 7 e1001255 10.1371/journal.pmed.1001255 33. Warensjö E , Sundström J , Vessby B , Cederholm T , Risérus U . Markers of Dietary Fat Quality and Fatty Acid Desaturation as Predictors of Total and Cardiovascular Mortality: A Population-Based Prospective Study . Am J Clin Nutr . 2008 ; 88 ( 1 ): 203 - 9 . doi: 10.1093/ajcn/88.1.203 . Warensjö E Sundström J Vessby B Cederholm T Risérus U Markers of Dietary Fat Quality and Fatty Acid Desaturation as Predictors of Total and Cardiovascular Mortality: A Population-Based Prospective Study Am J Clin Nutr 2008 88 1 203 209 10.1093/ajcn/88.1.203 34. Clarke R , Shipley M , Armitage J , Collins R , Harris W . Plasma Phospholipid Fatty Acids and CHD in Older Men: Whitehall Study of London Civil Servants . Br J Nutr . 2009 ; 102 ( 2 ): 279 - 84 . doi: 10.1017/S0007114508143562 . Clarke R Shipley M Armitage J Collins R Harris W Plasma Phospholipid Fatty Acids and CHD in Older Men: Whitehall Study of London Civil Servants Br J Nutr 2009 102 2 279 284 10.1017/S0007114508143562 35. Rocha DM , Caldas AP , Oliveira LL , Bressan J , Hermsdorff HH . Saturated Fatty Acids Trigger TLR4-Mediated Inflammatory Response . Atherosclerosis . 2016 ; 244 : 211 - 5 . doi: 10.1016/j.atherosclerosis.2015.11.015 . Rocha DM Caldas AP Oliveira LL Bressan J Hermsdorff HH Saturated Fatty Acids Trigger TLR4-Mediated Inflammatory Response Atherosclerosis 2016 244 211 215 10.1016/j.atherosclerosis.2015.11.015 36. Kemp JA , Esgalhado M , Macedo RA , Regis B , Damasceno NRT , Torres EAFS , et al . A Possible Link between Polyunsaturated Fatty Acids and Uremic Toxins from the Gut Microbiota in Hemodialysis Patients: A Hypothesis . Hemodial Int . 2019 ; 23 ( 2 ): 189 - 97 . doi: 10.1111/hdi.12725 . Kemp JA Esgalhado M Macedo RA Regis B Damasceno NRT Torres EAFS et al A Possible Link between Polyunsaturated Fatty Acids and Uremic Toxins from the Gut Microbiota in Hemodialysis Patients: A Hypothesis Hemodial Int 2019 23 2 189 197 10.1111/hdi.12725 37. Fernández-Castillejo S , Rubió L , Hernáez Á , Catalán Ú , Pedret A , Valls RM , et al . Determinants of HDL Cholesterol Efflux Capacity after Virgin Olive Oil Ingestion: Interrelationships with Fluidity of HDL Monolayer . Mol Nutr Food Res . 2017 ; 61 ( 12 ): 10.1002/mnfr.201700445 . doi: 10.1002/mnfr.201700445 . Fernández-Castillejo S Rubió L Hernáez Á Catalán Ú Pedret A Valls RM et al Determinants of HDL Cholesterol Efflux Capacity after Virgin Olive Oil Ingestion: Interrelationships with Fluidity of HDL Monolayer Mol Nutr Food Res 2017 61 12 10.1002/mnfr.201700445 doi: 10.1002/mnfr.201700445 38. Leal DP , Gonçalinho GHF , Tavoni TM , Kuwabara KL , Paccanaro AP , Freitas FR , et al . The Interplay of Sirtuin-1, LDL-Cholesterol, and HDL Function: A Randomized Controlled Trial Comparing the Effects of Energy Restriction and Atorvastatin on Women with Premature Coronary Artery Disease . Antioxidants . 2022 ; 11 ( 12 ): 2363 . doi: 10.3390/antiox11122363 . Leal DP Gonçalinho GHF Tavoni TM Kuwabara KL Paccanaro AP Freitas FR et al The Interplay of Sirtuin-1, LDL-Cholesterol, and HDL Function: A Randomized Controlled Trial Comparing the Effects of Energy Restriction and Atorvastatin on Women with Premature Coronary Artery Disease Antioxidants 2022 11 12 2363 10.3390/antiox11122363 39. Domínguez-López I , Arancibia-Riveros C , Casas R , Tresserra-Rimbau A , Razquin C , Martínez-González MÁ , et al . Changes in Plasma Total Saturated Fatty Acids and Palmitic Acid are Related to Pro-Inflammatory Molecule IL-6 Concentrations after Nutritional Intervention for One Year . Biomed Pharmacother . 2022 ; 150 : 113028 . doi: 10.1016/j.biopha.2022.113028 . Domínguez-López I Arancibia-Riveros C Casas R Tresserra-Rimbau A Razquin C Martínez-González MÁ et al Changes in Plasma Total Saturated Fatty Acids and Palmitic Acid are Related to Pro-Inflammatory Molecule IL-6 Concentrations after Nutritional Intervention for One Year Biomed Pharmacother 2022 150 113028 10.1016/j.biopha.2022.113028 40. Voon PT , Ng TK , Lee VK , Nesaretnam K . Diets High in Palmitic Acid (16:0), Lauric and Myristic Acids (12:0 + 14:0), or Oleic Acid (18:1) do Not Alter Postprandial or Fasting Plasma Homocysteine and Inflammatory Markers in Healthy Malaysian Adults . Am J Clin Nutr . 2011 ; 94 ( 6 ): 1451 - 7 . doi: 10.3945/ajcn.111.020107 . Voon PT Ng TK Lee VK Nesaretnam K Diets High in Palmitic Acid (16:0), Lauric and Myristic Acids (12:0 + 14:0), or Oleic Acid (18:1) do Not Alter Postprandial or Fasting Plasma Homocysteine and Inflammatory Markers in Healthy Malaysian Adults Am J Clin Nutr 2011 94 6 1451 1457 10.3945/ajcn.111.020107 41. Kalogeropoulos N , Panagiotakos DB , Pitsavos C , Chrysohoou C , Rousinou G , Toutouza M , et al . Unsaturated Fatty Acids are Inversely Associated and n-6/n-3 Ratios are Positively Related to Inflammation and Coagulation Markers in Plasma of Apparently Healthy Adults . Clin Chim Acta . 2010 ; 411 ( 7-8 ): 584 - 91 . doi: 10.1016/j.cca.2010.01.023 . Kalogeropoulos N Panagiotakos DB Pitsavos C Chrysohoou C Rousinou G Toutouza M et al Unsaturated Fatty Acids are Inversely Associated and n-6/n-3 Ratios are Positively Related to Inflammation and Coagulation Markers in Plasma of Apparently Healthy Adults Clin Chim Acta 2010 411 7-8 584 591 10.1016/j.cca.2010.01.023 42. Mu L , Mukamal KJ , Naqvi AZ . Erythrocyte Saturated Fatty Acids and Systemic Inflammation in Adults . Nutrition . 2014 ; 30 ( 11-12 ): 1404 - 8 . doi: 10.1016/j.nut.2014.04.020 . Mu L Mukamal KJ Naqvi AZ Erythrocyte Saturated Fatty Acids and Systemic Inflammation in Adults Nutrition 2014 30 11-12 1404 1408 10.1016/j.nut.2014.04.020 43. Kris-Etherton PM , Griel AE , Psota TL , Gebauer SK , Zhang J , Etherton TD . Dietary Stearic Acid and Risk of Cardiovascular Disease: Intake, Sources, Digestion, and Absorption . Lipids . 2005 ; 40 ( 12 ): 1193 - 200 . doi: 10.1007/s11745-005-1485-y . Kris-Etherton PM Griel AE Psota TL Gebauer SK Zhang J Etherton TD Dietary Stearic Acid and Risk of Cardiovascular Disease: Intake, Sources, Digestion, and Absorption Lipids 2005 40 12 1193 1200 10.1007/s11745-005-1485-y 44. Vlachopoulos C , Xaplanteris P , Aboyans V , Brodmann M , Cífková R , Cosentino F , et al . The Role of Vascular Biomarkers for Primary and Secondary Prevention. A Position Paper from the European Society of Cardiology Working Group on Peripheral Circulation: Endorsed by the Association for Research into Arterial Structure and Physiology (ARTERY) Society . Atherosclerosis . 2015 ; 241 ( 2 ): 507 - 32 . doi: 10.1016/j.atherosclerosis.2015.05.007 . Vlachopoulos C Xaplanteris P Aboyans V Brodmann M Cífková R Cosentino F et al The Role of Vascular Biomarkers for Primary and Secondary Prevention. A Position Paper from the European Society of Cardiology Working Group on Peripheral Circulation: Endorsed by the Association for Research into Arterial Structure and Physiology (ARTERY) Society Atherosclerosis 2015 241 2 507 532 10.1016/j.atherosclerosis.2015.05.007 45. van Rooijen MA , Plat J , Zock PL , Blom WAM , Mensink RP . Effects of Two Consecutive Mixed Meals High in Palmitic Acid or Stearic Acid on 8-h Postprandial Lipemia and Glycemia in Healthy-Weight and Overweight Men and Postmenopausal Women: A Randomized Controlled Trial . Eur J Nutr . 2021 ; 60 ( 7 ): 3659 - 667 . doi: 10.1007/s00394-021-02530-2 . van Rooijen MA Plat J Zock PL Blom WAM Mensink RP Effects of Two Consecutive Mixed Meals High in Palmitic Acid or Stearic Acid on 8-h Postprandial Lipemia and Glycemia in Healthy-Weight and Overweight Men and Postmenopausal Women: A Randomized Controlled Trial Eur J Nutr 2021 60 7 3659 3667 10.1007/s00394-021-02530-2 46. Li B , Leung JCK , Chan LYY , Yiu WH , Tang SCW . A Global Perspective on the Crosstalk between Saturated Fatty Acids and Toll-Like Receptor 4 in the Etiology of Inflammation and Insulin Resistance . Prog Lipid Res . 2020 ; 77 : 101020 . doi: 10.1016/j.plipres.2019.101020 . Li B Leung JCK Chan LYY Yiu WH Tang SCW A Global Perspective on the Crosstalk between Saturated Fatty Acids and Toll-Like Receptor 4 in the Etiology of Inflammation and Insulin Resistance Prog Lipid Res 2020 77 101020 10.1016/j.plipres.2019.101020 47. Lu H , Hao L , Li S , Lin S , Lv L , Chen Y , et al . Elevated Circulating Stearic Acid Leads to a Major Lipotoxic Effect on Mouse Pancreatic Beta Cells in Hyperlipidaemia Via a miR-34a-5p-mediated PERK/p53-dependent Pathway . Diabetologia . 2016 ; 59 ( 6 ): 1247 - 57 . doi: 10.1007/s00125-016-3900-0 . Lu H Hao L Li S Lin S Lv L Chen Y et al Elevated Circulating Stearic Acid Leads to a Major Lipotoxic Effect on Mouse Pancreatic Beta Cells in Hyperlipidaemia Via a miR-34a-5p-mediated PERK/p53-dependent Pathway Diabetologia 2016 59 6 1247 1257 10.1007/s00125-016-3900-0 48. Anderson EK , Hill AA , Hasty AH . Stearic Acid Accumulation in Macrophages Induces Toll-Like Receptor 4/2-Independent Inflammation Leading to Endoplasmic Reticulum Stress-Mediated Apoptosis . Arterioscler Thromb Vasc Biol . 2012 ; 32 ( 7 ): 1687 - 95 . doi: 10.1161/ATVBAHA.112.250142 . Anderson EK Hill AA Hasty AH Stearic Acid Accumulation in Macrophages Induces Toll-Like Receptor 4/2-Independent Inflammation Leading to Endoplasmic Reticulum Stress-Mediated Apoptosis Arterioscler Thromb Vasc Biol 2012 32 7 1687 1695 10.1161/ATVBAHA.112.250142 49. Spigoni V , Fantuzzi F , Fontana A , Cito M , Derlindati E , Zavaroni I , et al . Stearic Acid at Physiologic Concentrations Induces in Vitro Lipotoxicity in Circulating Angiogenic Cells . Atherosclerosis . 2017 ; 265 : 162 - 71 . doi: 10.1016/j.atherosclerosis.2017.09.004 . Spigoni V Fantuzzi F Fontana A Cito M Derlindati E Zavaroni I et al Stearic Acid at Physiologic Concentrations Induces in Vitro Lipotoxicity in Circulating Angiogenic Cells Atherosclerosis 2017 265 162 171 10.1016/j.atherosclerosis.2017.09.004 50. Stryjecki C , Roke K , Clarke S , Nielsen D , Badawi A , El-Sohemy A , et al . Enzymatic Activity and Genetic Variation in SCD1 Modulate the Relationship between Fatty Acids and Inflammation . Mol Genet Metab . 2012 ; 105 ( 3 ): 421 - 7 . doi: 10.1016/j.ymgme.2011.12.003 . Stryjecki C Roke K Clarke S Nielsen D Badawi A El-Sohemy A et al Enzymatic Activity and Genetic Variation in SCD1 Modulate the Relationship between Fatty Acids and Inflammation Mol Genet Metab 2012 105 3 421 427 10.1016/j.ymgme.2011.12.003 51. Marcos-Ramiro B , García-Weber D , Millán J . TNF-Induced Endothelial Barrier Disruption: Beyond Actin and Rho . Thromb Haemost . 2014 ; 112 ( 6 ): 1088 - 102 . doi: 10.1160/TH14-04-0299 . Marcos-Ramiro B García-Weber D Millán J TNF-Induced Endothelial Barrier Disruption: Beyond Actin and Rho Thromb Haemost 2014 112 6 1088 1102 10.1160/TH14-04-0299 52. Lee J , Lee S , Zhang H , Hill MA , Zhang C , Park Y . Interaction of IL-6 and TNF-α Contributes to Endothelial Dysfunction in Type 2 Diabetic Mouse Hearts . PLoS One . 2017 ; 12 ( 11 ): e0187189 . doi: 10.1371/journal.pone.0187189 . Lee J Lee S Zhang H Hill MA Zhang C Park Y Interaction of IL-6 and TNF-α Contributes to Endothelial Dysfunction in Type 2 Diabetic Mouse Hearts PLoS One 2017 12 11 e0187189 10.1371/journal.pone.0187189

Vinculação acadêmica

Este artigo é parte de dissertação de mestrado de Gustavo Henrique Ferreira Gonçalinho pela Universidade de São Paulo – Departamento de Nutrição.

Aprovação ética e consentimento informado

Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética do Hospital da Universidade de São Paulo sob o número de protocolo 0063.0.207.198-11. Todos os procedimentos envolvidos nesse estudo estão de acordo com a Declaração de Helsinki de 1975, atualizada em 2013. O consentimento informado foi obtido de todos os participantes incluídos no estudo.

Material suplementar

Para informação adicional, por favor, clique aqui. http://abccardiol.org/supplementary-material/2023/12008/2022-0598_AO_Supplementary_tables.pdf

Fontes de financiamento: O presente estudo foi financiado pela CAPES nº 8882.330835/2019-1 e FAPESP nº 2016/24531-3 e 2011/12523-2.

 Original Article Stearic Acid, but not Palmitic Acid, is Associated with Inflammatory and Endothelial Dysfunction Biomarkers in Individuals at Cardiovascular Risk Gonçalinho Gustavo Henrique Ferreira Acquisition of data Analysis and interpretation of the data Statistical analysis Writing of the manuscript and Critical revision of the manuscript for important intellectual content 1 Sampaio Geni Rodrigues Acquisition of data Analysis and interpretation of the data 1 0000-0001-7955-656X Soares-Freitas Rosana Aparecida Manólio Acquisition of data Analysis and interpretation of the data 1 Damasceno Nágila Raquel Teixeira Conception and design of the research and Obtaining financing Acquisition of data Analysis and interpretation of the data 1 Brasil Universidade de São Paulo – Departamento de Nutrição, São Paulo, SP – Brasil Mailing Address: Gustavo Henrique Ferreira Gonçalinho • Universidade de São Paulo Instituto do Coração – Cardiologia – Av. Dr. Enéas Carvalho de Aguiar, 44. Postal Code 05403-900, Cerqueira César, São Paulo, SP – Brazil E-mail: gustavo.goncalinho@usp.br

Potential conflict of interest

No potential conflict of interest relevant to this article was reported.

 Abstract Background

Several studies have associated dietary saturated fatty acids (SFAs) with cardiovascular risk but there are still many controversies. Most of these studies have focused on the effects of palmitic acid on circulating lipids. Stearic acid usually shows a neutral effect on blood lipids, however, there is a lack of clinical studies assessing the link with inflammatory and endothelial dysfunction markers.

 Objective

To evaluate the association of red blood cell (RBC) SFA (palmitic and stearic acids) with circulating inflammatory and endothelial dysfunction biomarkers.

 Methods

Cross-sectional study of 79 adults of both sexes with at least one cardiovascular risk factor but without previous events (acute myocardial infarction or stroke). Plasma biomarkers – lipids, glucometabolic markers, high-sensitivity C-reactive protein (hs-CRP), interleukin-6 (IL-6), interleukin-10 (IL-10), monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1), and tumor necrosis factor-α (TNF-α) – and RBC palmitic and stearic fatty acids were analyzed. The associations were assessed by correlation and multiple linear regression analyses, with statistical significance set at p < 0.05.

 Results

Palmitic acid showed no significant associations with traditional cardiovascular risk factors or inflammatory markers. Stearic acid, on the other hand, was inversely correlated with blood cholesterol and triglycerides, but independently associated with hs-CRP, IL-6, and TNF-α.

 Conclusion

Stearic acid is associated with inflammatory and endothelial dysfunction biomarkers in individuals with at least one cardiovascular risk factor.

 Fatty Acids Endothelium Inflammation Biomarkers Cardiovascular Diseases Introduction

The role of inflammation in cardiovascular diseases (CVDs) has gained much emphasis in the literature. Patients who are on intensive cholesterol-lowering therapy using statins, ezetimibe, and PCSK9 inhibitors may have a so-called “residual inflammatory risk”, in which patients with higher levels of inflammatory markers such as tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin-6 (IL-6) and C-reactive protein (CRP), despite cholesterol lowering, may experience more cardiovascular events when compared to patients with lower levels.1Several biomarkers of inflammation have been associated with the incidence, prevalence, severity, and prognosis of CVDs. They may reflect CVD from a different perspective than that of traditional risk factors since many studies have shown independence in the association of these markers.2Also, the increase in these circulating inflammatory markers has been associated with increased levels of vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1), intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1), and E-selectin, indicators of impaired endothelial function. This may explain the relationship between inflammation and CVD.3 , 4 Therefore, inflammatory markers such as CRP and IL-6 may also indicate endothelial dysfunction.2 - 4

Current evidence suggests that high intake of dietary saturated fatty acids (SFAs) is associated with increased cardiovascular risk,5and limiting SFA consumption to reduce this risk is still recommended by the recently published nutrition guidelines of the American Heart Association6and the Brazilian Society of Cardiology.7Mechanisms of how SFAs contribute to atherosclerosis progression and increase cardiovascular risk include mainly increased blood total cholesterol, low-density lipoprotein-cholesterol (LDL-c), triglycerides,8and inflammation.9 - 11

Among the mechanisms demonstrated in the literature, it has been shown that SFAs are activators of Toll-like receptors (TLRs) in macrophages, triggering the inflammatory signaling pathway and subsequently, immunometabolic dysfunctions found in cardiometabolic diseases.12Clinical evidence of how SFAs influence inflammation and consequently CVD risk remains controversial due to different methods.12Most studies have investigated the effects of palmitic acid; studies focusing on stearic acid have shown a nearly neutral effect on human health from the lipoprotein point of view. Studies on the influence of this SFA on biomarkers of endothelial function and inflammation are lacking.12Food surveys, commonly used in studies that assessed the effects of SFAs on health, contain several biases, and red blood cells (RBC) fatty acids have been used as biomarkers of the nutritional status of these nutrients,13and may provide more consistent evidence of how SFAs are associated with inflammation and endothelial function in humans.

Therefore, the objective of the present study is to evaluate the association of RBC SFAs (palmitic and stearic acids) with circulating biomarkers of inflammation and endothelial dysfunction in individuals with cardiovascular risk factors but without established CVD.

 Methods Study design and participants

This was a cross-sectional study of baseline data from the CARDIONUTRI clinical trial (ReBEC: RBR-2vfhfv). The participants were recruited from the outpatient clinic at the University of São Paulo Hospital. Inclusion criteria were individuals of both sexes, 30 to 74 years, with at least one cardiovascular risk factor, and no previous cardiovascular events (acute myocardial infarction or stroke). Exclusion criteria were individuals with acute or severe chronic diseases, infectious diseases, pregnant, and/or lactating women. Screened individuals were submitted to a short phone interview to assess inclusion and exclusion criteria. Additionally, individuals underwent an electrocardiogram conducted by a cardiologist and those with alterations suggesting previous cardiovascular events were excluded. Three hundred and seventy-four individuals were recruited for the study from 2011 to 2012. Two individuals declined after being informed about the study design. Fourteen were excluded due to altered electrocardiograms and two due to recent HIV diagnosis. At the end of the recruitment, 356 individuals were included in the CARDIONUTRI trial. For the present study analysis, only participants who had laboratory information on inflammatory markers (plasma cytokines) were included, resulting in 79 subjects ( Figure 1 ).

– Study flow chart.

Clinical and nutritional assessment

Medical history of non-communicable chronic diseases and current medication use was self-reported. Physical examination included body mass index (BMI), waist circumference, and blood pressure assessment. Dietary intake was obtained through three 24-hour recalls and assessed in the Food Processor software (ESHA Research, 2012), with subsequent energy adjustment.14Cardiovascular risk was assessed by the Framingham Risk Score,15 , 16 and individuals were classified as at low, moderate, or high risk. Diabetes was considered a coronary artery disease (CAD) equivalent.17

 Biochemical analysis

Blood was collected after a 12-h fast into EDTA tubes (1.0 mg/mL), and erythrocytes were separated from plasma by centrifugation; both were frozen at -80 °C immediately after collection. Protease inhibitors (10 µg/mL of aprotinin, 10 µg/mL of benzamidine, and 5 µg/mL of phenylmethylsulfonyl fluoride) and butylated hydroxytoluene (BHT, 100 µg/mL) were added to preserve samples. All samples were divided into aliquots to avoid repeated defrost cycles and stored at -80 °C until analyses. Plasma total cholesterol, high-density lipoprotein-cholesterol (HDL-c), triglycerides, glucose (Labtest Diagnostica SA, MG, Brazil), non-esterified fatty acids (NEFA), apolipoproteins (Apo) A-I and B (Wako Chemicals USA Inc., Richmond, VA, USA), and high sensitivity C-reactive protein (hs-CRP) (Diagnostic System Laboratories, Inc., Webster, TX, USA) were measured by commercial kits. Plasma interleukin (IL)-6, IL-10, monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1), and TNF-α were measured using a Bio-PlexTM Human Cytokine 17-plex Assay ELISA kit (Bio-Rad Laboratories, CA, USA). Serum insulin was measured by a Human Insulin ELISA kit (Life Technologies, NY, USA). LDL-c was calculated using the Friedewald equation.18Insulin sensitivity was measured by the Homeostasis Model Assessment – Insulin Resistance (HOMA-IR), and insulin resistance was diagnosed if the individuals presented any of the following conditions: BMI > 28.9 kg/m2, HOMA-IR >4.65, or BMI >27.5 kg/m2and HOMA-IR >3.60.19

 Red blood cell fatty acids analysis

Analysis of RBC fatty acids was performed by gas chromatography as described elsewhere.13After plasma separation, 300 μL of RBC were washed with 5 mL of phosphate-buffered saline (PBS) solution (pH 7.4) four times. The precipitate was transferred to screw-cap tubes, to which 1.75 mL of methanol, 50 µL of an internal standard solution containing 1 mg tridecanoic acid (C13:0)/1 mL hexane, and 100 µL of acetyl chloride were added. Thereafter, the solution was vortexed and heated in a water bath at 90 °C for one hour. After that, 1.5 mL of hexane was added, and the solution was homogenized for 1 min. The samples were centrifuged at 1500× g, 4 °C for two minutes, and 800 µL of the supernatant was transferred to a different tube. This step was repeated with the addition of 750 µL of hexane. The tubes containing the collected supernatants were placed in a centrifugal concentrator at 40 °C for 20 minutes. Then the FA methyl esters were dissolved in 150 µL of hexane and transferred to a glass insert in a vial. In total, 19 RBC fatty acids were detailed, which included SFA, monounsaturated FA (MUFA), and polyunsaturated fatty acids (PUFA). Among the RBC fatty acids we analyzed palmitic, stearic, arachidic, behenic, lignoceric, palmitoleic, oleic, gondoic, erucic, nervonic, linoleic, γ-linoleic, eicosadienoic, dihomo-γ-linoleic, arachidonic, 13,16-docosadienoic, α-linoleic, eicosapentaenoic, and docosahexaenoic acids. In the present study, we focused our analyses on SFAs, more specifically on stearic and palmitic acids, which were the most predominant SFA in erythrocytes.

 Statistical analysis

The distribution of variables was assessed through the Kolmogorov-Smirnov test. Sample characteristics are presented as mean and standard deviation (SD) or median and interquartile range (IQR) for quantitative variables, depending on the variables’ distribution, and frequency (n) and percentage (%) for categorical variables.

The relationship of SFAs with cardiometabolic parameters and cytokines was assessed through Pearson’s and Spearman’s correlations depending on the variables’ distribution.

To assess the influence of palmitic and stearic acids on inflammation biomarkers, multiple linear regressions were applied using the inflammation biomarkers (hs-CRP, IL-6, IL-10, MCP-1, TNF-α) as dependent variables, and palmitic or stearic acid as the independent variable in addition to the adjustment variables (age, sex, smoking, total cholesterol, systolic blood pressure, glucose, and BMI). All regression assumptions were fulfilled ( i.e ., no multicollinearity, homoscedasticity, normally distributed and independent errors, independence of the outcome variables, and linearity of the variables).

All statistical tests were two-sided, with p < 0.05 considered statistically significant, and performed on the SPSS software version 20.0.

 Results

Characteristics of the participants are summarized in Table 1 and Table S1. The sample was composed mainly of women (59.5%) and had a mean age of 51.0 ± 10.3 years. The prevalence of self-reported chronic disease in the sample was 60.8% of individuals with hypertension, 52.2% of dyslipidemia, and 25.3% of type 2 diabetes mellitus.

– Clinical and biochemical characteristics of the participants
Variables Mean/Median SD/IQR
Age, years 51.0 10.3
Body mass index, kg/m 2 31.5 6.1
Waist circumference, cm 101.5 13.1
Systolic blood pressure, mmHg 135.2 19.2
Diastolic blood pressure, mmHg 81.8 9.9
Heart rate, bpm 67.8 13.0
Total cholesterol, mg/dL 199.8 43.9
HDL-c, mg/dL 35.8 10.2
LDL-c, mg/dL 134.8 41.4
Total cholesterol:HDL-c 6.0 4.0 – 7.0
Non-HDL-c, mg/dL 164.4 45.0
ApoA-I, mg/dL 126.9 25.7
ApoB, mg/dL 101.8 26.9
Triglycerides, mg/dL 129.0 94.0 – 188.0
Non-esterified fatty acids, mEq/dL 0.62 0.25
Glucose, mg/dL 96.0 89.0 – 108.0
Insulin, μUI/mL 17.7 8.4
HOMA-IR 4.4 2.4
hs-CRP, mg/L 2.8 1.2 – 5.6
IL-6, pg/mL 5.3 3.3 – 9.0
IL-10, pg/mL 4.0 2.8 – 10.5
MCP-1, pg/mL 15.1 10.5 – 21.6
TNF-α, pg/mL 15.2 8.2 – 25.9

HDL: high-density lipoprotein, LDL: low-density lipoprotein, Apo: apolipoprotein, HOMA-IR: Homeostasis Model Assessment – Insulin Resistance, IL: interleukin, hs-CRP: high-sensitivity C-reactive protein; TNF-α: tumor necrosis factor-α, MCP-1: monocyte chemoattractant protein-1. SD: standard deviation; IQR: interquartile range

Regarding the Framingham Risk Score, most of the participants were classified as high cardiovascular risk (51.9%), followed by moderate risk (34.2%) and low risk (13.9%). The sample presented several cardiovascular risk factors, such as elevated BMI and waist circumference, hypercholesterolemia, low HDL-c, hyperglycemia, hyperinsulinemia, HOMA-IR, and elevated hs-CRP ( Table 1 ).

The RBC fatty acids profile is described in Table 2 . The most abundant RBC fatty acids were palmitic and stearic acids. The most abundant MUFA was oleic acid (C18:1 n-9). Among PUFA, the most abundant FA were linoleic acid and arachidonic acid of the n-6 family and docosahexaenoic acid (DHA) of the n-3 family.

– Profile of red blood cell fatty acids of the participants
Variables Mean/Median SD/IQR
SFA, %
C16:0 (Palmitic acid) 44.02 4.87
C18:0 (Stearic acid) 26.12 4.45
C20:0 (Arachidic acid) 0.73 0.18
C22:0 (Behenic acid) 1.29 0.51
C24:0 (Lignoceric acid) 0.27 0.14 – 0.77
MUFA, %
C16:1 n-7 (Palmitoleic acid) 0.33 0.22 – 0.76
C18:1 n-9 (Oleic acid) 8.99 3.71
C20:1 n-9 (Gondoic acid) 0.08 0.05 – 0.14
C22:1 n-9 (Erucic acid) 0.14 0.10 – 0.21
C24:1 n-9 (Nervonic acid) 1.36 0.67
PUFA n-6, %
C18:2 n-6 (Linoleic acid) 4.34 1.91
C18:3 n-6 (γ-linoleic acid) 0.17 0.12 – 0.24
C20:2 n-6 (Eicosadienoic acid) 0.10 0.07 – 0.17
C20:3 n-6 (Dihomo- γ-linoleic acid) 0.54 0.36
C20:4 n-6 (Arachidonic acid) 3.43 2.60
C22:2 n-6 (13,16-Docosadienoic acid) 0.39 0.21
Total n-6 9.18 4.07
PUFA n-3, %
C18:3 n-3 (α-linolenic acid) 1.64 1.01 – 2.28
C20:5 n-3 (Eicosapentaenoic acid) 0.24 0.14
C22:6 n-3 (Docosahexaenoic acid) 3.91 1.31
Total n-3 6.16 2.03

MUFA: monounsaturated fatty acids, PUFA: polyunsaturated fatty acids, SD: standard deviation; IQR: interquartile range.

The nutritional composition of the participants’ diet and its correlation with inflammatory markers are described in Table S2 and Table S3. The mean consumption of SFAs was 10.2 ± 3.9 %, with palmitic and stearic acids consumption of 6.4 ± 4.0 and 3.0 ± 2.4 g, respectively. There was no statistically significant correlation between dietary SFA and inflammatory markers.

The correlations between RBC SFA (palmitic and stearic acids) are described in Table 3 . Total cholesterol, non-HDL-c, total cholesterol: HDL-c ratio, apoB, and triglycerides were inversely correlated with stearic acid. However, hs-CRP, IL-6, IL-10, MCP-1, and TNF-α were positively correlated with stearic acid.

– Correlations between red blood cell fatty acids and cardiovascular biomarkers
Variables Palmitic acid Stearic acid
r p-value r p-value
Sex 0.079 0.490 0.197 0.082
Age, years 0.062 0.585 0.163 0.151
Body mass index, kg/m 2 0.013 0.907 -0.036 0.756
Waist circumference, cm 0.021 0.857 -0.076 0.506
Systolic blood pressure, mmHg 0.034 0.767 -0.113 0.323
Diastolic blood pressure, mmHg 0.024 0.833 -0.151 0.184
Heart rate, bpm 0.049 0.667 0.072 0.531
Total cholesterol, mg/dL -0.032 0.779 -0.253 0.024
HDL-c, mg/dL 0.089 0.434 0.198 0.080
LDL-c, mg/dL -0.088 0.453 -0.211 0.069
Total cholesterol:HDL-c* -0.083 0.468 -0.330 0.003
Non-HDL-c, mg/dL -0.052 0.649 -0.292 0.009
ApoA-I, mg/dL 0.155 0.173 -0.023 0.843
ApoB, mg/dL 0.009 0.936 -0.290 0.009
Triglycerides, mg/dL* -0.011 0.927 -0.244 0.030
Non-esterified fatty acids, mEq/dL 0.283 0.016 -0.007 0.954
Glucose, mg/dL* -0.114 0.317 -0.034 0.768
Insulin, μUI/mL 0.133 0.298 -0.220 0.083
HOMA-IR 0.093 0.467 -0.210 0.099
hs-CRP, mg/L* 0.114 0.325 0.286 0.012
IL-6, pg/mL* 0.017 0.881 0.340 0.002
IL-10, pg/mL* 0.029 0.833 0.357 0.007
MCP-1, pg/mL* 0.034 0.769 0.245 0.030
TNF-α, pg/mL* 0.009 0.938 0.364 0.002

HDL: high-density lipoprotein, LDL: low-density lipoprotein, Apo: apolipoprotein, HOMA-IR: Homeostasis Model Assessment – Insulin Resistance, IL: interleukin, hs-CRP: high-sensitivity C-reactive protein; TNF-α: tumor necrosis factor-α, MCP-1: monocyte chemoattractant protein-1, SD: standard deviation; IQR: interquartile range; the correlation analysis was performed using Pearson’s test for parametric variables and Spearman’s test (*) for non-parametric variables

In the multiple linear regression models ( Table 4 ), palmitic acid did not present any statistically significant association with inflammatory biomarkers, whereas stearic acid was independently factor associated with hs-CRP, IL-6, and TNF-α when adjusted by age, sex, smoking status, total cholesterol, systolic blood pressure, plasma glucose, and BMI.

– Associations between red blood cell fatty acids and circulating inflammation and endothelial dysfunction biomarkers
Dependent variables R2 β SE 95% CI for β p-value
Lower Upper
Palmitic acid (C16:0)
hs-CRP 0.079 0.165 0.162 -0.158 0.489 0.311
IL-6 0.110 0.132 1.789 -3.438 3.702 0.941
IL-10 0.127 0.728 2.134 -3.589 5.024 0.735
MCP-1 0.091 0.399 2.184 -3.957 4.756 0.855
TNF-α 0.127 0.112 1.279 -2.445 2.669 0.930
Stearic acid (C18:0)
hs-CRP 0.162 0.545 0.194 0.157 0.933 0.007
IL-6 0.173 4.620 2.026 0.577 8.664 0.026
IL-10 0.186 4.370 2.359 -0.379 9.120 0.070
MCP-1 0.116 3.584 2.526 -1.454 8.623 0.160
TNF-α 0.194 3.230 1.443 0.345 6.116 0.029

Multiple linear regression models adjusted by age, sex, smoking status, total cholesterol, systolic blood pressure, glucose, and body mass index. The models were composed by one of the dependent variables – high-sensitivity C-reactive protein (hs-CRP); interleukin-6 (IL-6), IL: interleukin-10 (IL-10), monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) and tumor necrosis factor-α (TNF-α) and independent variables (palmitic acid or stearic acid and the adjustment variables), 95%CI: 95% confidence interval

 Discussion

The main finding of our study ( Central Illustration ) was that stearic acid was independently associated with circulating biomarkers of endothelial dysfunction and inflammation despite inverse correlations with atherogenic blood lipids in individuals with cardiovascular risk factors without CVD. Additionally, there was statistically significant association of palmitic acid with any of the biomarkers assessed.

: Stearic Acid, but not Palmitic Acid, is Associated with Inflammatory and Endothelial Dysfunction Biomarkers in Individuals at Cardiovascular Risk Hs-CRP: high-sensitivity C-reactive protein; IL: Interleukin; CVD: cardiovascular disease.

Limiting SFA intake for cardiovascular risk lowering is recommended by recently published nutrition guidelines.6 , 7 A meta-analysis of randomized controlled trials (RCT) showed that palm oil rich in palmitic acid raised LDL-c by 9 mg/dL when compared to low-SFA vegetable oils.20This can be translated into a 6% higher risk of coronary artery disease (CAD).21Another meta-analysis showed that dietary SFA reduction decreased LDL-c by 5 mg/dL in children and adolescents.22Importantly, these effects occur when fatty acid intake range is within 20 to 30% of total daily energy intake. When the fatty acid energy intake is greater than 30%, the magnitude of the LDL-c raising effect by SFA increased to 24 mg/dL.20However, other studies showed weak associations between SFA intake and CVD outcomes.23 , 24 These controversies could be explained by the replacement of SFAs with refined carbohydrates,25and comparing the effects of SFA with trans- fatty acid, animal fat, or coconut oil,20could make it difficult to evaluate the real effect of SFA. Furthermore, most observational studies do not distinguish the overall effects of palmitic acid and stearic acid, which are found more in palm oil and butter and lard, respectively.26

In our study, however, palmitic acid did not have any significant correlation with blood cholesterol. It was an unexpected result since it is known that palmitic acid raises total cholesterol and LDL-c.27Although red blood cells’ SFAs reflect the SFA intake,28it is also known that carbohydrate intake modulates circulating SFA levels through de novo lipogenesis, causing a discrepancy between nutritional status and SFA intake.12 De novo lipogenesis is found elevated in obesity,12which could explain the lack of association between RBC and dietary fatty acid found in the present study (Table S3). Furthermore, total fatty acids and SFA intake was not high (29.7% energy and 10.2% energy, respectively), making it unlikely that palmitic acid causes hypercholesterolemia at these intake levels.20

Stearic acid, on the other hand, showed a significant inverse correlation with total cholesterol, non-HDL-c, apoB, and triglycerides. One RCT reported that the effects of stearic, oleic, and linoleic acids on lipoproteins had no difference, suggesting that stearic acid, unlike the palmitic acid, does not raise LDL-c.29A recent meta-analysis showed that replacing dietary palmitic acid with stearic acid had little or no effect on total cholesterol, LDL-c, and apoB.27Furthermore, dietary substitution of stearic acid with MUFA or PUFA showed that concentrations of LDL-c, HDL-c, total cholesterol, or triglycerides were not affected, contrasting with the effects when palmitic acid was replaced by MUFA or PUFA. This corroborates the hypothesis that dietary stearic acid might be less detrimental than palmitic acid on blood lipids. Thus, our results corroborate this hypothesis, since RBC stearic acid showed more favorable correlations with blood lipids compared to palmitic acid.

The association between circulating SFA and cardiovascular risk has been controversial. The meta-analysis of Chowdhury et al.23found no relationship between SFA status biomarkers and coronary outcomes. However, these results have been criticized,30since the meta-analysis included studies that used different lipid fractions, which reflect dietary fatty acid intake variously (e.g., fasting plasma fatty acid reflects intake over the last 3-4 days, whilst plasma phospholipid fatty acids reflect intake over the last months).23 , 30 Of the eight studies included in the meta-analysis,23four studies analyzing plasma phospholipids, showed significant associations with coronary heart disease and mortality,31 - 34 with stronger associations with palmitic and stearic acids.

In addition to modulation of lipoprotein metabolism, SFAs may influence cardiovascular risk through inflammation.12SFAs act as non-microbial Toll-like receptor 4 (TLR4) agonists, triggering inflammatory pathways through nuclear factor kappa B (NF-κB), which plays a crucial role in the induction of inflammatory mediators such as IL-1β, IL-6, MCP1, TNF-α, and others.35SFA also trigger TLR4 activation indirectly by the overproduction of lipopolysaccharides and uremic toxins by gut microbiota after a high-fat dietary intake. This metabolic endotoxemia leads to oxidative stress thereby producing atherogenic lipids – oxidized LDL (oxLDL) and oxidized phospholipids – which trigger the CD36-TLR4-TLR6 complex inflammatory response.35 , 36 Furthermore, high SFA consumption increases lipemia and minimally modified LDL and oxLDL levels, which activate CD14-TLR4-MD2 inflammatory pathway.35In addition, high SFA consumption may alter HDL lipid composition and cholesterol efflux capacity, decreasing its function and increasing cardiovascular risk.37 , 38

In line with that, our study showed that RBCSFA are independently associated with inflammatory markers. However, this association was restricted to stearic acid. Palmitic acid is known to induce the inflammatory response.35In an analysis of a PREDIMED sub-sample, plasma SFA and specifically palmitic acid were positively associated with higher levels of circulating pro-inflammatory molecules, particularly IL-6.39On the other hand, Voon et al.40showed that a high palmitic acid diet did not modify inflammatory biomarkers. However, SFA status biomarkers were not measured in the study. Other studies showed that circulating total SFAs are associated with higher inflammatory markers circulating levels such as hs-CRP and IL-6,33 , 34 , 41 , 42 and higher cardiovascular risk31but when analyzed separately, the associations tend to be more significant and stronger with stearic acid, suggesting that palmitic acid alone does not modify cardiovascular risk in the same magnitude as with stearic acid.31 - 34 , 42

Due to its neutral effect on lipoprotein metabolism, stearic acid has been considered a dietary substitute for trans fatty acids for cardiovascular risk reduction.43However, cardiovascular risk goes beyond major traditional risk factors,13and several emerging potential cardiovascular biomarkers that reflect different aspects of cardiovascular health are being studied.3 , 44 The independent association of RBC stearic acid with hs-CRP, IL-6, and TNF-α found in our study suggests a pro-inflammatory and endothelial dysfunction-causing action, and consequently, a cardiovascular risk-raising effect of the fatty acids, independently of their effects on lipoprotein metabolism, corroborating the aforementioned studies.31 - 34 , 42 Nonetheless, most of the studies are observational. A recent RCT comparing a palmitic acid-rich diet and a stearic acid-rich diet showed that although better lipid metabolism effects, stearic acid increased the circulating levels of low-grade inflammation markers.45Laboratory studies show that stearic acid has comparable effects to palmitic acid in activating the TLR4/Nf-κB inflammatory response cascade.46A previous study demonstrated that stearic acid is a major contributor to lipotoxicity in beta cells of mice, showing more detrimental effects than palmitic acid in beta cell survival and glucometabolic control.47However, we did not observe any association between SFA and glucometabolic markers in the study. It was also shown that treatment of M1polarized macrophages with stearic acid increases their susceptibility to inflammation and endoplasmic reticulum (ER) stress through TLR4/2-independent inflammation.48Additionally, stearic acid at physiological concentrations, but not palmitic acid, induces lipotoxic effects on circulating angiogenic cells (CACs), thereby reducing its endothelial repair capacity.49Moreover, the expression of pro-inflammatory genes induced by stearic acid increases ER stress and CAC apoptosis, which could be associated with increased vascular damage and dysfunction.49The association of stearic acid found in the present study can also be explained by its effect of increasing the activity of stearoyl-CoA desaturase 1 (SCD1), a lipogenic enzyme associated with metabolic dysfunction and chronic low-grade inflammation, but the mechanisms which SCD1 increases inflammation are unknown.50However, we did not evaluate single nucleotide polymorphisms or SCD1 activity in our study.

Together, the findings of our study and the cited literature corroborate the pro-inflammatory effect of stearic acid. It is known that hs-CRP, IL-6, and TNF-α are not only markers of systemic inflammation but also endothelial dysfunction biomarkers.51 , 52 Endothelial dysfunction is the main hallmark of CVD and is associated with worse prognostic independently of risk factors.1Accordingly, high levels of stearic acid might increase residual inflammatory cardiovascular risk independently of blood cholesterol levels. Our work has limitations due to its cross-sectional nature, the small sample, and the lack of clinical outcomes. The strengths of the study include the use of RBC fatty acids a biomarker of SFA status and the use of inflammation and endothelial dysfunction biomarkers. The reason why RBC fatty acids were not correlated with dietary FA may be attributed to various biases embedded in food surveys, suggesting the advantage of using FA status biomarkers, specifically RBC fatty acids, which reflect FA intake approximately over the last three months.

 Conclusions

In conclusion, our findings showed that RBC stearic acid is independently associated with inflammatory and endothelial dysfunction biomarkers in individuals with at least one cardiovascular risk factor.

 Acknowledgments

The authors cordially thank Elizabeth Torres for making the gas chromatography equipment available for the study.

Study association

This article is part of the thesis of master submitted by Gustavo Henrique Ferreira Gonçalinho, from Universidade de São Paulo – Departamento de Nutrição.

Ethics approval and consent to participate

This study was approved by the Ethics Committee of the Hospital da Universidade de São Paulo under the protocol number 0063.0.207.198-11. All the procedures in this study were in accordance with the 1975 Helsinki Declaration, updated in 2013. Informed consent was obtained from all participants included in the study.

Supplemental Materials

For additional information, please click here. http://abccardiol.org/supplementary-material/2023/12008/2022-0598_AO_Supplementary_tables.pdf

Sources of funding: This study was partially funded by CAPES nº 8882.330835/2019-1 and FAPESP nº 2016/24531-3 and 2011/12523-2.